微小RNA-30b-3p在肝脏缺血再灌注损伤小鼠肝组织中的表达及意义

目的 探讨微小RNA-30b-3p(miR-30b-3p)在肝脏缺血再灌注损伤(IRI)小鼠肝组织中的表达,并阐述可能的机制.方法 将40只无特定病原体级雄性健康C57BL/6小鼠随机分为IRI组、假手术组、miRNA阴性对照(miR-NC)组和miR-30b-3p agomir组,每组10只.IRI组、miR-NC组和miR-30b-3p agomir组小鼠建立肝脏IRI模型,假手术组小鼠仅进行开腹及关腹等操作.造模前24 h,miR-NC组和miR-30b-3p agomir组小鼠分别经尾静脉注射10 nmol·L-1的miR-NC或miR-30b-3p agomir 0.3 mL;假手术组和IRI组小鼠术前不进行干预.采用生物化学法检测各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;苏木精-伊红染色法观察小鼠肝组织病理学改变;荧光脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法标记肝细胞凋亡情况;免疫组织化学法检测各组小鼠肝组织中Caspase-3表达与分布;实时荧光定量聚合酶链反应检测小鼠肝组织中miR-30b-3p表达;Western blot法检测小鼠肝组织中Bcl-2、Fas相关死亡域蛋白(FADD)、Bax及Cleave Caspase-3蛋白的表达.结果 IRI组和miR-NC组小鼠血清ALT、AST水平显著高于假手术组(P＜0.05),miR-30b-3p agomir组与假手术组小鼠血清ALT、AST水平比较差异无统计学意义(P＞0.05).miR-30b-3p agomir组小鼠血清ALT、AST水平显著低于IRI组(P＜0.05);miR-NC组与IRI组小鼠血清ALT、AST水平比较差异无统计学意义(P＞0.05).miR-30b-3p agomir组小鼠血清ALT、AST水平均显著低于miR-NC组(P＜0.05).IRI组、miR-NC组小鼠肝组织中miR-30b-3p相对表达量显著低于假手术组(P＜0.05),miR-30b-3p agomir组小鼠肝组织中miR-30b-3p相对表达量显著升高(P＜0.05);miR-30b-3p agomir组小鼠肝组织中miR-30b-3p相对表达量显著高于IRI组(P＜0.05),miR-NC组与IRI组小鼠肝组织中miR-30b-3p相对表达量比较差异无统计学意义(P＞0.05),miR-30b-3p agomir组小鼠肝组织中miR-30b-3p相对表达量显著高于miR-NC组(P＜0.05).IRI组和miR-NC组小鼠肝细胞凋亡率显著高于假手术组(P＜0.05),miR-30b-3p agomir组小鼠肝细胞凋亡率与假手术组比较差异无统计学意义(P＞0.05);miR-30b-3p agomir组小鼠肝细胞凋亡率显著低于IRI组(P＜0.05);miR-NC组与IRI组小鼠肝细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P＞0.05);miR-30b-3p agomir组小鼠肝细胞凋亡率显著低于miR-NC组(P＜0.05).IRI组和miR-NC组小鼠肝组织中Caspase-3相对表达量显著高于假手术组(P＜0.05);miR-30b-3p agomir组与假手术组小鼠肝组织中Caspase-3相对表达量比较差异无统计学意义(P＞0.05);miR-30b-3p agomir组小鼠肝组织中Caspase-3相对表达量显著低于IRI组(P＜0.05),miR-NC组与IRI组小鼠肝组织中Caspase-3相对表达量比较差异无统计学意义(P＞0.05);miR-30b-3p agomir组小鼠肝组织中Caspase-3相对表达量显著低于miR-NC组(P＜0.05).与假手术组比较,IRI组、miR-NC组小鼠肝组织中FADD、Bax、Cleave Caspase-3相对表达量均显著增加(P＜0.05),Bcl-2相对表达量显著减少(P＜0.05);miR-30b-3p agomir组与假手术组小鼠肝组织中FADD、Bax、Cleave Caspase-3及Bcl-2相对表达量比较差异均无统计学意义(P＞0.05);与IRI组比较,miR-30b-3p agomir组小鼠肝组织中FADD、Bax及Cleave Caspase-3相对表达量显著降低(P＜0.05),Bcl-2相对表达量显著增加(P＜0.05);miR-NC组与IRI组小鼠肝组织中FADD、Bax、Cleave Caspase-3及Bcl-2相对表达量比较差异均无统计学意义(P＞0.05);与miR-NC组比较,miR-30b-3p agomir组小鼠肝组织中FADD、Bax及Cleave Caspase-3相对表达量均显著降低(P＜0.05),Bcl-2相对表达量显著增加(P＜0.05).结论 miR-30b-3p可减轻小鼠肝脏IRI,其机制可能与抑制FADD/Caspase-3信号通路所介导的肝细胞凋亡有关.