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四氢嘧啶高产菌株的筛选及发酵条件的优化
目的 人工诱变选育高产四氢嘧啶的菌株.方法 以海神盐单胞菌Halomonas neptunia ATCC BAA-805为出发菌株,采用紫外线和亚硝基胍复合诱变处理,获得四氢嘧啶产量提高突变株,采用单因素实验优化发酵培养基及发酵条件,进一步提高突变株的四氢嘧啶产量.结果 Halomonas neptunia ATCC BAA-805经复合诱变处理,获得突变株UN-2,摇瓶发酵四氢嘧啶产量达1.8 g/L,与出发菌株相比产量提高了53.8%.单因素优化实验结果为UN-2菌株在酵母粉浓度4.0 g/L,葡萄糖浓度20 g/L,氯化钠浓度7%(w/v),pH 7.5条件下,四氢嘧啶产量为5.53 g/L.结论 本研究诱变选育的菌种是适于商业化生产四氢嘧啶的优良菌株.
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四氢嘧啶类化合物药理学作用研究进展
四氢嘧啶类化合物是一类含有嘧啶杂环结构的有机物,Galinski于20世纪80年代第1次在极端嗜盐菌中发现四氢嘧啶具有渗透调节功能,并鉴定其结构.自此,四氢嘧啶类化合物受到化学与药理学科研工作者的广泛关注与研究.由于其结构及分子电荷的分布与赖氨酸和左旋精氨酸相似,因此,该类化合物具有多种生物及药理活性,包括抗菌、抑菌、抗肿瘤、抗人类免疫缺陷病毒(HIV)、保护DNA活性的作用,以及抗炎镇痛和抑制环氧酶-2活性等作用.
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四氢嘧啶对人冰冻红细胞质量影响的初步研究
目的 通过在红细胞深低温冰冻的冻存液中添加渗透压调节物-四氢嘧啶(ectoine),检测红细胞冰冻前后的质量,探讨ectoine用于深低温冰冻红细胞的可能性,为ectoine可用于红细胞深低温冰冻的研究提供实验依据.方法 取悬浮红细胞样品8袋,每袋分为对照组(复方甘油组、甘油组)和实验组(1.5% ectoine甘油组、3% ectoine甘油组和4.5% ectoine甘油组)共5组.实验组:ectoine起始浓度为1.5%、3%与4.5% (W/V)(加红细胞后终浓度为1.05%、2.10%与3.15%).将5组(2组对照组与3组实验组)冻存液分别加入红细胞,红细胞冰冻后解冻并洗涤.测定冰冻前(未加冻存液)及解冻洗涤后红细胞数、血红蛋白量、红细胞变形性、渗透脆性,并用电镜扫描,观察红细胞显微形态.结果 与2组对照组相比,3% ectoine甘油组红细胞回收率高(89.26±2.60)%(P<0.05);3%ectoine甘油组解冻洗涤的红细胞与冰冻前红细胞,在50-1、100-1、200-1和1 000-1的剪切率值上相比P>0.05,差异无统计学意义;1.5% ectoine甘油组解冻洗涤的红细胞,50%溶血率时氯化钠浓度为(4.57±0.08) g/L,3% ectoine甘油组(4.80±0.17) g/L,2组分别与复方甘油组(4.98±0.26) g/L相比P<0.05,差异具有统计学意义;电镜扫描显示3组实验组红细胞与复方甘油组红细胞解冻洗涤后,均无棘状和球形红细胞,甘油组可见破膜、皱缩的红细胞.结论 3% Ectoine作为渗透压调节物用于冰冻红细胞,可用于高浓度甘油冰冻红细胞时作为渗透压调节物,相对于3%乳酸钠的复方甘油(商品化复方甘油),可提高解冻洗涤的红细胞回收率,改善解冻洗涤的红细胞质量,具有在深低温冰冻红细胞的潜力.