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  • 应用SSH技术研究H2O2胁迫下细粒棘球蚴基因的表达

    作者:侯秋莲;王慧;张壮志;李江伟;张富春;张文宝

    目的 构建H2O2胁迫下细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus)与正常组织差异表达的消减cDNA文库.方法 以H2O2胁迫细粒棘球蚴cDNA为试验方(tester),正常生长的细粒棘球蚴cDNA为驱动方(driver),应用抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH)研究H2O2胁迫下细粒棘球蚴基因的表达.结果 文库扩增后得到124个阳性克隆,菌落PCR分析,均得到200~1 000 bp插入片段.将整个文库克隆进行测序,测得序列结果 利用BLAST在线软件与GenBank数据库进行同源序列比对分析和BlastX分析.结果 获得重要基因的cDNA序列,如氧化还原酶、蛋白激酶、生长因子等.另有部分克隆在GenBank中无法查到对应的同源基因,可能代表了新基因.结论 成功构建了H2O2胁迫与正常组织差异表达的消减cDNA文库,为研究细粒棘球蚴在抗氧化过程中的相关靶基因筛选奠定基础.

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