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人小肠上皮细胞文献资料
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霍乱弧菌毒力基因zot的克隆表达及生物活性
目的 对霍乱弧菌zot毒力基因进行表达并研究重组蛋白的生物活性.方法 从霍乱弧菌(Vibrio cholerae)MO45中克隆zot的全基因序列,构建其原核表达质粒pET-32a(+)-zot并转化至大肠杆菌E.coli BL21 (DE3)中,通过诱导表达和亲和层析纯化重组蛋白,研究zot表达蛋白对人小肠上皮细胞的凋亡作用.结果 纯化蛋白的浓度为0.324 mg/mL,经Western blot验证表达蛋白为目的蛋白,用流武细胞仪检测经表达蛋白作用的人小肠上皮细胞显示重组zot蛋白能引起人小肠上皮细胞的早期凋亡.结论 成功克隆表达了霍乱弧菌毒力基因zot,重组蛋白能引起人小肠上皮细胞的早期凋亡.
