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硫氧环蛋白过氧化物酶1对矽肺大鼠肺纤维化的影响
目的 探讨硫氧环蛋白过氧化物酶1(Prx-1)对矽肺大鼠肺组织纤维化的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠按抽签法随机分为4组:对照组(生理盐水)、SiO2组(50 mg/只)、SiO2+空慢病毒组(空慢病毒滴度5×107 TU)和SiO2+-Prx-1慢病毒组(Prx-1慢病毒滴度5×107 TU),每组10只.气管内注入SiO2和慢病毒,造模后饲养4周.HE染色观察肺组织形态学变化、免疫组化法检测α-SMA表达,Western blot法检测肺组织Prx-1及Ⅰ和Ⅲ型胶原水平、硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)水平.结果 ① SiO2+Prx-1慢病毒组的Prx-1蛋白表达明显高于SiO2+空慢病毒组,差异有统计学意义(P<0.05);② 对照组大鼠肺组织结构基本正常;SiO2组和SiO2+空慢病毒组大鼠肺泡壁增厚或断裂,细胞性矽结节形成;但SiO2+Prx-1慢病毒组大鼠肺泡壁变薄,矽结节体积减小;③ 与对照组比较,SiO2组α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白 、Ⅲ型胶原蛋白及MDA表达水平均明显增加,差异有统计学意义(P<0.05).SiO2+空慢病毒组的α-SMA、Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白及MDA表达水平与SiO2组无明显区别;但与SiO2+空慢病毒组比较,SiO2+Prx-1慢病毒组的α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白 、Ⅲ型胶原蛋白及MDA表达水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.05).结论 Prx-1能够抑制SiO2诱导的肺组织纤维化,这一作用与降低ROS、抑制肌成纤维细胞分化有关.
关键词： 矽肺 活性氧 肌成纤维细胞 硫氧环蛋白过氧化物酶1 -
AKT通路在Peroxiredoxin-1抑制转化生长因子β1诱导肺成纤维细胞合成胶原中的作用
目的 探讨AKT通路在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肺成纤维细胞合成胶原中的作用,及硫氧环蛋白过氧化物酶1(Prx-1)对此作用的影响.方法 体外培养肺成纤维细胞,随机分为4组:(1)对照组:以0.4％血清浓度MEM作为基础培养液孵育培养;(2)TGF-β1组:0.4％血清培养条件下,给予TGF-β1(5 μg/L)孵育细胞;(3)TGF-β1+转染对照组:空质粒载体转染肺成纤维细胞36 h,同步化12 h后,给予TGF-β1(5μg/L)孵育细胞;(4)TGF-β1+Prx-1转染组:Prx-1表达质粒转染肺成纤维细胞36 h,同步化12 h后,给予TGF-β1(5μg/L)孵育细胞.脂质体转染法将Prx-1表达质粒转染肺成纤维细胞,Western blot法检测Prx-1、Ⅰ和Ⅲ型胶原、磷酸化AKT (p-AKT)表达,二氯荧光素二乙酸检测活性氧(ROS)水平.结果 (1)Prx-1表达质粒转染肺成纤维细胞后,Prx-1蛋白表达高于TGF+β1+转染对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).(2)与对照组比较,TGF-β1组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、ROS水平及p-AKT蛋白表达均明显增加,差异有统计学意义(P＜0.01).与TGF-β1组比较,TGF-β1+转染对照组的Ⅰ和Ⅲ型胶原、ROS及p-AKT水平无明显变化(P＞0.05),但TGF-β1+Prx-1转染组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、ROS及p-AKT蛋白水平明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 TGF-β1能够诱导肺成纤维细胞生成ROS,并由此促进AKT的激活和肺成纤维细胞合成Ⅰ、Ⅲ型胶原,而Prx-1可通过抑制ROS来抑制TGF-β1的作用.
