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免疫印渍技术文献资料
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日本血吸虫感染兔尿液中具有诊断价值的循环抗原组分分析
目的 分析日本血吸虫感染兔尿液中具有诊断价值的循环抗原(CAg) 组分,为建立尿液CAg 免疫学诊断方法 奠定基础.方法 十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析尿液中蛋白抗原组分;甘氨酸盐酸缓冲液(简称甘盐液)解离尿液中循环免疫复合物(CIC),通过抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原(Solube egg antigen,SEA)的鸡卵黄免疫球蛋白(IgY),采用免疫印渍技术(Westernblot)对解离后的CAg 组分进行分析.结果 SDS-PAGE 结果 显示,正常兔尿液中未见明显蛋白条带;感染兔尿液在未作CIC 解离前,有2 条主带和3 条次带,主带分子量为146kDa 和60kDa,次带分子量为108kDa、72 kDa 和67 kDa;而利用甘盐液解离感染兔尿液中的CIC 后,仅见1 条主带和1 条次带,分子量分别为68kDa 和86kDa.对甘盐液处理后的感染兔尿液作Western blot 分析,结果 显示其与日本血吸虫感染兔血清和抗日本血吸虫SEA 特异性IgY 抗体反应的蛋白条带均为68kDa,而与正常兔血清和免疫前IgY 反应不产生条带.结论 日本血吸虫感染兔尿液中存在具有诊断价值的CAg 组分,有望建立基于IgY 的尿液CAg 免疫学诊断方法.
