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  • 结核分枝杆菌Rv1512基因的特异性和克隆表达

    作者:曹廷明;贾红彦;杜凤娇;刘洋;刘忠泉;马玙;张宗德

    目的 鉴定结核分枝杆菌Rv1512基因的特异性,克隆表达该基因并获得其重组蛋白.方法 设计Rv1512基因的特异性引物,并鉴定其特异性.构建pET30a(+):Rv1512重组质粒,阳性克隆转化入大肠杆菌BL21.经Ni+ -NTA层析柱纯化融合蛋白,通过SDS-PAGE鉴定该蛋白及其纯度.结果 结核分枝杆菌Rv1512基因的特异性被证实;经测序分析证实Rv1512原核表达质粒构建正确,SDS-PAGE结果显示在40 kD处呈现单一蛋白条带.结论 结核分枝杆菌Rv1512基因具有较好的特异性;成功构建表达载体pET30a(+ ):Rv1512并获得重组蛋白,为辅助诊断结核分枝杆菌的感染奠定基础.

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