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bHLH-Zip文献资料
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固醇调控核因子bHLH-Zip的原核表达及其抗血清的制备
[目的]制备固醉调控核因子bHLH-Zip片段及其多克隆抗血清,为细胞固醇代谢及调脂药物研究提供材料.[方法]将人源固醇调节元件结合蛋白SREBP的N端第323-553位氨基酸残基的基因序列即bHLH-Zip片段克隆到表达载体pcDNA4/hismaxA,得到重组质粒pHisbHLH-Zip,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)pLys,IPTG诱导表达；裂解细菌并纯化目的蛋白；用纯化后的蛋白免疫小鼠制备多克隆抗血清,采用间接ELISA法测定效价.[结果]获得纯化bHLH-Zip片段,并制备其多克隆抗血清.抗bHLH-Zip抗血清的效价为1∶16000.[结论]bHLH-Zip核因子是一段可溶性蛋白,并可制备产生具有较高效价的多克隆抗血清,这为研究细胞固醇代谢及调脂药物对SREBP通路的影响奠定了基础.
关键词： 固醇调节元件结合蛋白 bHLH-Zip 原核表达 多克隆抗血清
