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黄连解毒汤对小鼠脑缺血慢性神经损伤的保护作用
目的:观察黄连解毒汤对小鼠脑缺血慢性神经损伤的保护作用.方法:以大脑中动脉阻塞(MCAO)15 min诱导小鼠短暂性局灶性脑缺血.从术前7 d开始,用药组灌服黄连解毒汤2 g/kg和4 g/kg,实验对照组和假手术组灌服生理盐水,均连续给药21 d,一日一次.缺血后35 d(5周)内进行神经症状评分、斜板试验,并记录小鼠的终生存率.实验结束后,测定脑损伤体积和神经元数量.结果:黄连解毒汤4 g/kg能显著提高小鼠MCAO术后35 d的终生存率,2 g/kg和4 g/kg均明显改善术后的神经症状,降低脑梗死体积、减轻脑萎缩.黄连解毒汤4 g/kg可明显增加缺血侧海马CA1区、纹状体和皮层的神经元密度,2 g/kg明显增加缺血侧海马CA1区的神经元密度.结论:黄连解毒汤对小鼠局灶性脑缺血慢性神经损伤有保护作用,能提高小鼠的终生存率并促进神经功能的恢复.
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基因芯片在中药复方研究中的应用
目的探讨基因芯片技术在中药药理研究中应用的可能性和目前的局限性,以促进新的分子生物学技术在中药研究中的应用.方法以黄连解毒汤及其成分黄芩苷和盐酸小檗碱灌胃LPS造型的Balb/c小鼠,采用上海联合基因公司小鼠基因表达谱芯片(2048个基因),检测中药对小鼠脾细胞基因表达的影响.结果复方的作用明显优于有效成分的作用,但对具体基因表达影响的分析存在一定难度.结论基因芯片技术可以用于中药作用机理的研究,特别是其高通量有助于解决中药作用靶点多的问题,但目前此技术的广泛应用还存在一定困难,特别是如何正确分析所获得的大量信息.
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清热解毒法对肺炎衣原体感染致兔动脉粥样硬化的干预作用
[目的]观察清热解毒法对肺炎衣原体(Cpn)感染致动脉粥样硬化(AS)发病进程的干预作用.[方法]在轻度高脂饲料(含2.5g/kg胆固醇)喂养条件下,以Cpn经鼻腔接种52只新西兰兔,6周内共3次接种,6周末抽血检测Cpn特异性IgG抗体(Cpn-IgG),阳性者(N=44)随机分为4组:中药高剂量组(A组)、中药低剂量组(B组)、西药组(C组)和模型对照组(D组),每组11只,分别以高剂量黄连解毒汤(HJD)(2g·kg-1·d-1)、低剂量HJD(1 g·kg-1·d-1)、阿奇霉素(20mg·kg-1·d-1)和生理盐水灌胃6周,另设立高脂对照组(E组,N=8).接种前、接种后、治疗后分别采血检测血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)的水平,治疗后再次检测Cpn-IgG,第18周末处死全部动物取主动脉标本进行病理学观察,并分别采用聚合酶链反应(PCR)和免疫组化法检测该组织中Cpn-DNA、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达.[结果]实验结束时,在D组和E组模型兔主动脉上均观察到典型的AS病理改变,前者更为严重.与D组相比,A、C两组模型兔的主动脉AS病理损害明显减轻,AS指数如大内膜厚度、AS病变占管周百分比、斑块面积指数等明显改善(均P＜0.05或P＜0.01),B组也有一定程度的改善但不及前两组明显;各组主动脉标本Cpn-DNA检测均为阴性;动脉壁TNF-α的表达与AS的病变严重程度明显相关,其表达集中于AS病灶区;第12周末C组血清Cpn-IgG阳性率明显低于A、B、D组,差异均有显著性意义,而后3组间差异无显著性意义;C组接种Cpn后血清hs-CRP水平较E组明显升高,差异有非常显著性意义,治疗后C组和D组比较无显著性差异,而A、B组hs-CRP水平明显降低,与D组比较差异有显著性意义(均P＜0.05或P＜0.01).[结论]Cpn感染可复制AS兔模型,hs-CRP、TNF-α等炎症因子激活参与了AS的发病.阿奇霉素和HJD均能抑制这种AS的病理进程,阿奇霉素可能主要通过抗C阳感染发挥作用,而HJD可能通过拮抗Cpn感染引发的炎症过度反应而发挥作用.
关键词： 黄连解毒汤/药理学 动脉粥样硬化/中药疗法 动脉粥样硬化/病理学 衣原体 肺炎 疾病模型 动物 兔 -
清热复方对热休克大鼠肝、肺组织热休克蛋白基因表达的调控作用
[目的]探讨清热复方对大鼠热休克蛋白70(HSP70)表达的调控作用.[方法]将70只大鼠随机分为热休克模型组、热休克加白虎汤组、热休克加黄连解毒汤组、内毒素模型组、内毒素加白虎汤组、内毒素加黄连解毒汤组和正常对照组7组,每组10只.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对热休克模型组、内毒素模型组和正常对照组大鼠的肝、肺组织进行了HSP70 mRNA表达的检测,观察清热复方白虎汤和黄连解毒汤分别对两种模型大鼠肝、肺组织HSP70 mRNA表达的影响.[结果]热休克模型组、热休克加白虎汤组和热休克加黄连解毒汤组中HSP70 mRNA的表达高于正常对照组(P＜0.05);热休克加白虎汤组和热休克加黄连解毒汤组均高于热休克模型组(P＜0.05);内毒素模型组、内毒素加白虎汤组和内毒素加黄连解毒汤组之间的HSP70 mRNA表达以及与正常对照组相比均无显著性差异(P＞0.05).[结论]提示不同因素导致的热证状态下HSP70的基因表达不一致,清热复方可诱导热休克大鼠肝、肺组织中HSP70表达的增加,从而提高细胞的耐受力,避免细胞组织的损伤.
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黄连解毒汤对内毒素类炎症模型小鼠血中白细胞介素2的影响
为进一步探讨黄连解毒汤(黄连、黄柏、黄芩、栀子组成)对T细胞来源的细胞因子的调节作用,采用腹腔注射D-氨基半乳糖和脂多糖攻击小鼠造成内毒素类炎症模型,用放射免疫法检测观察了黄连解毒汤对该模型小鼠血清白细胞介素2(IL-2)的影响.结果表明黄连解毒汤在2.5kg/L、1.25kg/L剂量时可有效提高IL-2水平.提示黄连解毒汤可升高T细胞来源的细胞因子IL-2水平.
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中药对大肠埃希菌抗生素耐药性逆转作用的实验研究
目的:探讨三黄汤、黄连解毒汤和五味消毒饮三种汤剂对ESBLs阳性E.coli恢复对抗生素敏感性的可能性及逆转机制.方法: 用纸片扩散法和双纸片协同法筛选产ESBLs的E.coli,用试管二倍稀释法确定三种中药方剂的MIC,选取低于MIC的不同浓度在规定时间下培养耐药E.coli,测定各中药不同浓度的逆转效果和佳逆转浓度.提取ESBLs并测定酶活性和含量.结果: 三黄汤在0.2g/ml24h,黄连解毒汤在0.1g/ml24h,五味消毒饮在0.3g/ml24h的逆转效果佳,但与克拉维酸(30μg/ml)比较有显著性差异(P＜0.05). 结论: 中药能够通过抑制ESBLs的活性和减少产量达到逆转细菌耐药性.
