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微粒培养文献资料
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人骨髓基质干细胞在不同诱导环境下向软骨细胞的分化
目的:探索重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)诱导建系的人骨髓基质干细胞(hBMSC,专利名缩写为MSCxj)生成软骨的可行性、佳剂量及适宜的诱导环境.方法:rhBMP-2分为六组:空白组、100ng/ml组、200ng/ml组、400ng/ml组、600ng/ml组和800ng/ml组.血清浓度分为三组:无血清组、2%血清组和5%血清组.根据rhBMP-2和血清不同浓度间的组合,设计18种诱导模式.一部分MSCxj制成微球,模拟三维模式进行细胞爬片培养,另一部分MSCxj直接用96孔板培养,10d后,检测MSCxj的数量、总蛋白生成量和碱性磷酸酶生成量,并行甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原mRNA检测,利用MPS60病理图像软件分析各组Ⅱ型胶原mRNA染色后的灰度,比较各组Ⅱ型胶原mRNA的生成量.结果:血清浓度越高细胞生成的数量越多,细胞合成的总蛋白无显著差异,rhBMP-2对细胞数量和总蛋白的合成无明显影响.2%的血清浓度比其他血清浓度更利于软骨生成.在该血清浓度下rhBMP-2为400ng/ml时,细胞特异性基质Ⅱ型胶原生成多(F=19.56, P＜0.05).结论:rhBMP-2能诱导MSCxj生成软骨,在血清浓度为2%、自身浓度为400ng/ml水平下诱导MSCxj生成软骨能力强.
