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膜型基质金属蛋白2文献资料
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实时荧光定量PCR检测MT2-MMP在肺癌中的表达及其临床相关性
目的 建立实时荧光定量PCR检测肺癌组织中膜型基质金属蛋白酶2(MT2-MMP)基因表达的方法,并探讨MT2-MMP的临床相关性.方法 肺癌组织及癌旁正常组织取自21例非小细胞肺癌手术患者.设计人MT2-MMP、内参照p-actin基因的引物及TaqMan探针,将MT2-MMP及β-actin基因扩增片段纯化后分别构建重组质粒,制备标准品.检测肺癌及癌旁正常组织中MT2-MMP及β-actin的基因表达水平,并分析其临床相关性.结果 经测序验证,PCR扩增产物为MT2-MMP及β-actin基因的特异片段.MT2-MMP,β-actin基因表达灵敏度分别为600拷贝/ml,300拷贝/ml,线性范围分别为6×10<'2>～6×10<'7>拷贝/ml、3×10<'2>～3×10<'7>拷贝/ml,相关系数均为1.000,扩增效率分别为88.1%、86.2%,批间变异系数分别为0.40%～1.55%、0.59%～3.98%.MT2-MMP在肺癌组织中的基因表达水平显著高于癌旁正常组织(P<0.05),但与患者临床病理参数无相关性.结论 成功构建了检测人MT2-MMP的实时荧光定量PCR方法,该法特异性好,灵敏度高;MT2-MMP可能参与肺癌的发生发展过程.
