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粒细胞集落刺激因子及其受体对人黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性的影响
目的 探讨粒细胞集落刺激因子受体(G-CSFR)在人黑素细胞中的表达及重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对人黑素细胞生物学作用的影响.方法 分别用普通的合成培养基与添加一定浓度rhG-CSF的合成培养基培养健康人的黑素细胞,并对黑素细胞的生长情况及形态进行观察.应用流式细胞仪检测人黑素细胞、中性粒细胞及红白血病细胞( HEL 92.1.7)中G-CSFR的表达率.Western印迹、逆转录聚合酶链反应( RT-PCR)方法分别检测黑素细胞、中性粒细胞及HEL 92.1.7中G-CSFR蛋白及G-CSFR mRNA的表达情况；噻唑蓝比色法(MTT法)检测不上浓度rhG-CSF( 200、400、600、800 μg/L)对黑素细胞增殖作用.多巴氧化法检测黑素细胞的酪氨酸酶活性.结果 黑素细胞G-CSFR的表达率(76.81％±10.70％)较HEL92.1.7 (2.53％±1.54％)明显升高(P＜0.01),略低于中性粒细胞(85.76％±15.71％,P＜0.05)；黑素细胞可表达G-CSFR蛋白和mRNA,不同浓度rhG-CSF处理组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).黑素细胞G-CSFR蛋白和mRNA的表达水平明显高于HEL 92.1.7 (P＜ 0.01),低于中性粒细胞(P＜ 0.05或P＜0.01).rhG-CSF在200～800μg/L时均有促黑素细胞增殖的能力,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P＜ 0.01或P＜0.05)；在200～ 600 μg/L范围内呈浓度依赖性(P＜0.01),600μg/L时的效应( 164.04％±13.0％)与20 μg/L的TPA作用(165.62％±10.6％)相当(P＞ 0.05)；200～800 μg/L的rhG-CSF对黑素细胞酪氨酸酶活性的影响与空白对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 人黑素细胞可表达G-CSFR；rhG-CSF具有促进黑素细胞增殖的作用,但对酪氨酸酶活性无影响.
