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附睾蛋白激酶抑制剂文献资料
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人类精子表面附睾蛋白激酶抑制剂Eppin和精囊凝固蛋白Semenogelin的相互作用研究
目的:探讨人类精子表面一种附睾蛋白激酶抑制剂Eppin和精囊凝固蛋白Semenogelin(Sg)的相互关系.方法:①用抗Eppin的抗体与精子和精浆中Eppin蛋白进行免疫沉淀反应;②免疫荧光法在精浆和精子表面共同显色定位;③重组Eppin(rEppin)和重组精囊凝固蛋白Sg(rSg)共同孵育,用抗Eppin抗体或抗Sg抗体进行免疫共沉淀;④Western印迹检测rEppin和rSg相互作用;⑤放射性125I-rSg与rEppin结合达饱和后,用未标记的rSg竞争性结合分析;⑥放射性125I-rSg直接与印迹膜上的rEppin行放射性自显影.结果:人精子表面蛋白Eppin与精囊蛋白Sg发生特异性结合,Sg分子结构中的半胱氨酸残基Cys-239是唯一的结合位点,Cys-239的还原及羧甲基化将阻碍125I-rEppin与rSg的结合.结论:Eppin与Sg的结合是靠分子结构中二硫化键的参与.在人类射精后的精子表面,精囊蛋白Sg结合在精子表面的Eppin上.
