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CD135文献资料
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人Flt3全长基因的克隆及其逆转录病毒表达载体的构建
目的克隆人Flt3全长基因,构建PGE/Plt3逆转录病毒表达载体.方法以人骨髓cDNA等基因文库为模板,采用分段克隆、人工PCR延伸及PCR连接等方法,获得了人Flt3全长基因,并构建Flt3基因的逆转录病毒表达载体.结果成功克隆FFl3全长基因和构建PGEZ/Flt3逆转录病毒表达载体.结论Flt3全长基因克隆及构建逆转录病毒表达载体的成功,为构建Flt3转基因细胞和制备抗人Flt3单克隆抗体和研究Flt3的生物学功能奠定了物质基础,也为低丰度和长片段基因克隆提供了有价值的经验.
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"一箭双星法"构建Flt3转基因细胞株
目的构建稳定表达Flt3分子的转基因细胞株.方法将Flt3基因重组入逆转录病毒载体pEGZ-term,通过293T细胞的包装获得具有感染能力的完整重组病毒载体,进而采用"一箭双星法"即同时感染BaF和L929细胞,构建Flt3转基因细胞株.结果成功获得稳定表达Flt3的转基因细胞株BaF/Flt3和L/Flt3.结论采用"一箭双星法"成功构建Flt3转基因细胞株,为以Flt3为靶分子的研究奠定了物质基础,也为类似的高难度的转基因细胞株的构建提供了有价值的经验.
