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高效液相色谱-荧光法测定SLE患者血清色氨酸及其代谢产物
目的 建立一种同时测定血清色氨酸(tryptophan,Trp)、犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)和犬尿喹啉酸(kynurenic acid,Kyna)的高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FD),并用此法检测SLE患者血清中Trp及其代谢产物Kyn、Kyna的含量.方法 血清标本经0.624 mol/L的高氯酸溶液去除蛋白质后取上清液20μl直接进样分析测定.色谱柱为Hypemil C18柱,流动相为0.20mol/L醋酸锌、8.3 mmol/L醋酸和2.5%的乙腈;流速为1.5 ml/min;荧光检测激发波长和发射波长在0～11 min分别为365nm和480 nm,11～15.5 min变换为344 nm和404 nm,15.5～20 min为254 nm和404 nm.采用建立的方法 测定体检健康者和SLE患者血清Trp、Kyn和Kyna的含量.结果 Trp的线性范围为0.610～196μmol/L,低检出浓度为0.05 μmol/L,平均回收率为103.71%;Kyn线性范围为0.049～98 μmol/L,低检出浓度为0.025μmol/L,平均回收率为97.45%;Kyna线性范围为1.050～1047 nmol/L,低检出浓度为0.050 nmol/L,平均回收率为100.60%.日内、日间测定值的变异系数均小于5%.苯丙氨酸、酪氨酸、5-羟色胺对测定均无干扰.与正常对照组比较,SLE患者的Trp含量显著减少,Kyn和Kyna的含量及Kyn/Trp的比值显著增高.结论 建立的HPLC-FD法能同时测定血清中Trp、Kyn和Kyna的含量,简便、快速、灵敏、特异.
关键词： 高效液相色谱法-荧光法 系统性红斑狼疮 色氨酸 犬尿氨酸 犬尿喹啉酸 -
沙丁胺醇在家犬体内药代动力学研究
沙丁胺醇(salbutamol)为选择性β-受体激动剂，能选择性激动支气管平滑肌的β2受体，有较强的支气管扩张作用，临床用于治疗支气管哮喘症，该药不易被破坏，故本品口服有效［1］。但因其血药浓度很低，难以实现临床血药浓度监测，因此国内较详细的药代动力学研究报道甚少。 沙丁胺醇体内药物分析方法,国外有文献报道采用气-质联用法(GC-MS）［2］，由于仪器及试剂条件限制，该法在许多实验室难以开展。我们采用Sep-Pak C18固相色谱预处理小柱分离富集后，以反相HPLC-荧光法定量检测血浆中沙丁胺醇的分析方法。应用本法进行家犬口服沙丁胺醇的药代动力学研究，为临床合理用药提供参考。
关键词： 沙丁胺醇 高效液相色谱法-荧光法 药代动力学
