首页 > 文献资料
-
RNA干扰骨肉瘤中抗增殖蛋白基因的表达对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响
目的 探讨RNA干扰骨肉瘤中抗增殖蛋白(prohibitin)基因的表达对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响和机制.方法 收集2013年6月至2014年8月行骨肉瘤穿刺和活检存档的骨肉瘤及相应瘤旁组织的蜡块标本共40例,提取骨肉瘤及相应瘤旁组织中的总RNA及总蛋白,应用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白印迹法(Western blot)分别检测prohibitin基因的mRNA和蛋白表达;阴性对照小于扰RNA(NC-siRNA)组和RNA干扰(prohibitin-siRNA)组转染MG63细胞,不经任何处理的细胞作为空白对照组;转染48 h后提取细胞中的蛋白,Western blot检测各组细胞中prohibitin的蛋白表达以及增殖细胞核抗原(PCNA)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Cleaved caspase-3)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝氨酸苏氨酸激酶(AKT)、磷酸化AKT (p-AKT)的蛋白表达;CCK8实验检测并计算细胞增殖率;采用Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡,流式细胞术测定细胞凋亡率.结果 患者骨肉瘤组织中prohibitin的mRNA和蛋白的相对表达量均显著高于瘤旁组织(P均＜0.01).与空白对照组及NC-siRNA组比较,在RNA干扰组转染prohibitin-siRNA后MG63细胞的prohibitin蛋白相对表达量显著降低(P均＜0.01);RNA干扰组细胞存活率及Ki67、PCNA、PI3K、p-AKT蛋白相对表达量显著降低(P均＜0.01),细胞凋亡率及Cleaved caspase-3蛋白相对表达量显著升高(P均＜0.01).结论 RNA干扰沉默prohibitin的表达可显著降低骨肉瘤细胞的增殖活力,并诱导细胞凋亡,其机制与抑制PI3K/AKT信号通路有关.
-
脑源神经营养因子在腮腺多形性腺瘤和瘤旁组织中的表达及意义
目的：观察脑源神经营养因子（ BDNF）在腮腺多形性腺瘤（ PA）和瘤旁组织中的表达，并探讨其意义。方法选择35例PA标本（A组）和同一标本距瘤0．5 cm（B1组）、1．0 cm（B2组）、1．5 cm（B3组）、2．0 cm（B4组）的瘤旁组织，9例正常腮腺标本（ C组）。采用免疫组化法检测细胞内和细胞核BDNF的表达，IPP6．0软件分析阳性细胞的积分光密度（ IOD）。结果各组细胞内BDNF表达均为阳性，表达强度集中在阳性和中度阳性。 A、B1、B2、B3、B4、C组的IOD分别为24311±3597、22536±4366、23557±4138、23829±3551、24019±3624和23137±873，两两比较，P均＞0．05。 A、B1、B2、B3、B4和C组细胞核BDNF阳性表达分别为33、16、9、9、3、1例，A组细胞核BDNF阳性表达率与其他组比较，P均＜0．05。结论 PA细胞内BDNF表达无明显变化，但细胞核BDNF表达明显升高；表明PA存在BDNF从细胞质到细胞核的亚细胞定位变化，可能与其发病有关，可作为诊断PA早期发生的生物标记之一。
-
子宫肌瘤及瘤旁平滑肌组织中 miR-18 a及 ERα的表达分析
目的：子宫肌瘤及瘤旁平滑肌组织中miR-18a及ERα的表达分析。方法选取子宫肌瘤患者的肌瘤组织标本68例,取其瘤旁组织作为对照,比较子宫肌瘤组织和瘤旁组织、单发肌瘤组织和多发肌瘤组织中miR-18a和ERα表达的差异,分析子宫肌瘤组织中miR-18a和ERα表达的相关性。结果子宫肌瘤组织的miR-18a表达平均光密度(95.28±4.50)低于瘤旁组织(138.54±5.62),差异具有显著性(P<0.05)；子宫肌瘤组织的ERα表达平均光密度(381.49±18.35)高于瘤旁组织(935.21±24.68),差异具有显著性(P<0.05)。多发肌瘤组织的miR-18a表达平均光密度(89.35±4.05)低于单发肌瘤组织(102.84±4.18),差异具有显著性(P<0.05)；多发肌瘤组织的ERα表达平均光密度(367.54±25.17)高于单发肌瘤组织(392.71±22.29),差异具有显著性(P<0.05)；子宫肌瘤组织的miR-18a表达平均光密度与ERα表达平均光密度呈负相关(r=-0.485,P<0.001)。结论 miR-18a在子宫肌瘤组织特别是多发肌瘤组织中呈低表达,而ERα呈高表达,可能为miR-18a影响了子宫肌瘤组织中ERα的表达。
