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人白细胞介素17cDNA的克隆及表达
目的获取重组的人白细胞介素17以进行科学研究和应用.方法应用RT-PCR的方法,从经PHA活化的人外周血单个核细胞中扩增hIL-17cDNA的编码序列,将其克隆至测序载体pBS SKⅡ(+)中进行测序,再将其亚克隆至表达载体pBV220中,在大肠杆菌XL1-Blue中进行表达.结果克隆获得了hIL-17cDNA,经热诱导后使hIL-17蛋白在大肠杆菌中的表达量达到了39.7%.结论通过克隆hIL-17cDNA的编码序列及热诱导使hIL-17蛋白在大肠杆菌中得到了高效表达.
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重组人白细胞介素17的纯化及生物活性鉴定
目的:探讨重组人白细胞介素17的复性与纯化方法,并进行活性鉴定.方法:表达重组人白细胞介素17(rhIL-17)的大肠杆菌经破碎、包涵体洗涤、裂解提取、复性、Sephacryl S-100层析柱纯化等方法,获得rhIL-17;通过ELISA方法检测IL-6的含量,间接反映rhIL-17的生物学活性.结果:经纯化得到rhIL-17,其相对分子质量为159 000,蛋白纯度为97.2%,能够刺激人胚肺成纤维细胞MRC-5产生IL-6,呈浓度依赖关系.结论:通过本方法复性与纯化获得高纯度、有生物学活性的rhIL-17.
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Anti-CCP及IL-17在RA早期患者中的临床应用价值
目的：探讨抗环瓜氨酸多肽抗体(Anti-CCP)及人白细胞介素17(IL-17)在RA早期患者血清中的水平及临床意义。方法56例RA患者和30例健康体检者,ELISA法检测血清中Anti-CCP和IL-17水平,放射学方法评估RA活动度及骨侵蚀程度,进行相关性分析。结果 Anti-CCP及IL-17在RA活动组与缓解组、骨侵蚀组与非骨侵蚀组比较差异有统计学意义(<0.05), IL-17与Anti-CCP呈正相关,且随病情活动而升高。结论 RA早期患者血清中存在异常增高的Anti-CCP及IL-17,其水平与病情活动相关,Anti-CCP及IL-17可作为RA活动度及骨侵蚀程度的参考指标。
