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  • 鼠内皮细胞抑制素的克隆及在COS-7细胞中的分泌表达

    作者:汤宇澄;孙文长;居中华;钱关祥

    目的 从小鼠肝脏中克隆出endostatin并在COS-7细胞中分泌表达,为其在肿瘤抗血管基因治疗中的应用打下基础。方法 用RT-PCR从鼠肝脏扩增出内皮细胞抑制素cDNA并克隆人测序载体PUC-T测序证实后,装入分泌表达载体pSEC-hygromycin,用DEAE-葡聚糖转染COS-7细胞,从mRNA水平及蛋白水平检测内皮细胞抑制素的表达。结果 测序结果 显示所克隆的小鼠endostatin cDNA与文献报道的完全一致,RT-PCR显示转染后的COS-7细胞有endostatin的mRNA表达,Western-blot显示转染后的COS-7细胞上清及包浆内均有目的 蛋白的表达。结论 成功克隆并分泌表达了小鼠endostatin。

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