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VEGF对小鼠髁突关节软骨影响的体外实验研究
目的:通过研究不同浓度VEGF作用下离体培养小鼠髁突关节软骨的改变,探讨VEGF对离体培养小鼠髁突骨关节炎的直接影响.方法:取4周龄C57雄性小鼠髁突126个,随机分为21小组,每组6个.加入不同浓度(100 ng/mL、500 ng/mL、1μg/mL、2μg/mL)的VEGF进行离体培养.在不同的时间点(1、2、4、7d)获取样本后,采用H-E染色、番红O快绿复合染色观察样本髁突的形态结构,并通过Mankin评分评价样本软骨改变;采用免疫组织化学方法观察各组样本中VEGFR2、MMP9、MMP13、TRANCE的表达.采用SPSS 23.0软件包对结果进行统计学分析.结果:H-E染色显示,与不作任何处理的空白对照组相比,加入VEGF离体培养的实验组小鼠髁突软骨结构破坏,肥大细胞增生.番红O快绿复合染色显示,与未加入VEGF的对照组相比,实验组小鼠髁突蛋白多糖含量降低,软骨发生退行性改变.对番红0快绿复合染色采用Mankin评分系统评分,结果表明,不同VEGF刺激时间组内,随着浓度的增高,Mankin评分增高,差异显著(P<0.05).不同VEGF浓度组内,随着刺激时间的增加,Mankin评分增高,差异显著(P<0.05).免疫组织化学显示,离体培养时加入VEGF的实验组,VEGFR2、MMP9、MMP13、TRANCE表达量较对照组显著增多.结论:在离体培养条件下,VEGF可直接引起小鼠颞下颌关节发生骨关节炎.