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四种骨质疏松治疗药物对原代SD大鼠成骨细胞MGP表达的影响
目的 观察4种常用骨质疏松治疗药物(维生素K2、PTH、活性维生素D3、阿仑膦酸盐)对原代SD大鼠成骨细胞基质gla蛋白(MGP) mRNA表达的影响,探讨MGP在骨质疏松发病中的可能作用.方法 采用胰酶-胶原酶序贯消化法获得新生1～3天内SD大鼠颅盖骨成骨细胞,进行原代培养.第二代细胞经Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶(ALP)、矿化结节染色进行成骨细胞表型鉴定后给予不同浓度的维生素K2、PTH、活性维生素D3、阿仑膦酸盐干预培养24 h后抽提成骨细胞总RNA,采用荧光实时定量RT-PCR检测成骨细胞MGP基因mRNA的表达.结果 (1)原代成骨细胞Ⅰ型胶原染色呈棕红色,ALP染色显示细胞内棕黑细微颗粒,可形成矿化结节.(2)4种常见骨质疏松药物均上调成骨细胞MGP mRNA的表达,维生素K2浓度为10-5、10-6、10-7 mol/L时成骨细胞MGP mRNA的表达量分别是空白对照组的2.56、2.12、1.57倍,差异均有统计学意义(P＜0.05).PTH(1-34)浓度为10-7、10-8、10-9 mol/L时,升高成骨细胞MGPmRNA的表达量分别是空白对照组的6.78、5.31、2.23倍,差异均有显著性(P＜0.05).活性维生素D3浓度为10-8、10-9和10-m mol/L时成骨细胞MGP mRNA的表达量分别是空白对照组的8.93、6.95、3.47倍,差异均有统计学意义(P＜0.05).(3)阿仑膦酸盐为10-4、10-5、10-6 mol/L时成骨细胞MGP mRNA的表达量是空白对照组的3.47、2.49、1.98倍,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 骨质疏松治疗药物维生素K2、PTH、活性维生素D3、阿仑膦酸盐均可促进原代培养SD大鼠成骨细胞MGP mRNA的表达,且呈剂量依赖性.MGP可能为骨质疏松治疗药物作用的共同靶点,参与了骨质疏松的发病机制.
关键词： 骨质疏松治疗药物 基质Gla蛋白 大鼠 Sprague-Dawley 成骨细胞 -
纳米胶束复合物PEG-PLL-OPG对小鼠骨质疏松及动脉硬化的影响
目的：将PEG-PLL 吸附骨保护蛋白（OPG）基因质粒，制成纳米复合药 PEG-PLL-OPG （PPO），观察其在体内外对成骨细胞（OB）及动脉硬化（AS）的影响，探讨其成为治疗骨质疏松（OP）和动脉硬化药物的可能性。方法：调查人群中OP和AS 的发病情况，并将人群分为健康组、AS 组、AS 合并OP 组并采集血清，利用采集的血清培养 OB 并治疗，流式、MTT、茜素红染色、扫描电镜检测 OB 凋亡、活性及在聚己内酯（PCL）的附着和钙化。尾静脉注射 PPO，观察其对 ApoE／RANKL＋／＋小鼠骨密度和动脉硬化的影响。结果：在体外， PPO 增加了 OB 活性、抑制凋亡，促进细胞钙化及在 PCL 上的附着；在体内， PPO 使小鼠动脉粥样斑块面积减小、钙化减轻，增加其股骨颈的骨密度。结论： PPO 可能作为治疗骨质疏松和动脉硬化的药物之一。
