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人甲状腺过氧化物酶抗原决定簇基因在大肠杆菌的表达及临床测定应用
目的表达有抗原活性的人甲状腺过氧化物酶(hTPO)片段,并将表达产物用于临床测试.方法将hTPO抗原决定簇基因连入pGEX-4T-3,然后转入E. coli BL21,异丙基β-D-硫代半乳糖苷诱导表达.表达产物谷胱甘肽巯基转移酶(GST)-hTPO经亲和层析纯化,并鉴定免疫学活性.以GST-hTPO为抗原建立检测血清TPO抗体(Ab)的ELISA方法.用此方法检测一批自身免疫性甲状腺疾病(AITD)患者血清TPOAb,用病理学方法观察同批患者甲状腺组织中HLA-DR抗原、树突状细胞及淋巴细胞浸润程度.结果成功地表达了hTPO抗原决定簇基因,纯化产物GST-hTPO纯度高,有良好的免疫学活性,以此抗原建立的ELISA方法有良好的重复性,CV在5.93%～7.59%之间.ELISA方法与RIA方法比较,检测结果显著相关(n=37,r=0.613,P＜0.001).血清TPOAb水平及HLA-DR抗原、树突状细胞分布随甲状腺组织淋巴细胞浸润程度加重呈逐渐增多趋势.结论原核表达产物GST-hTPO可用于建立TPOAb常规检测方法;AITD患者血清TPOAb水平与甲状腺组织损伤有密切关系.
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不同碘摄入量大鼠甲状腺功能及其TG、TPO mRNA的表达
目的 从基因表达水平研究不同碘摄入量对大鼠甲状腺功能的影响。方法 Wistar大鼠分为低碘、适碘、高碘三组，观察尿碘含量，血清及甲状腺组织激素水平，甲状腺组织甲状腺球蛋白(TG)、甲状腺过氧化物酶(TPO)mRNA的表达。结果 低碘组血清及组织T4、T3明显降低，尿碘含量显著减少，甲状腺TPO mRNA表达显著升高，而TG mRNA表达明显降低。高碘组血清T4呈下降趋势，甲状腺组织T4下降明显，尿碘显著增高，甲状腺TG、TPO mRNA表达均显著降低。结论 长期低碘造成大鼠甲状腺功能严重低下，甲状腺TPO mRNA表达呈代偿性增强，而TG mRNA表达显著降低。碘摄入过多抑制甲状腺TPO mRNA、TG mRNA的表达，从而造成甲状腺激素合成降低，这是甲状腺的一种自身保护机制，也是对长期高碘的一种适应。
关键词： 甲状腺 碘 碘化物过氧化物酶(甲状腺过氧化物酶) 甲状腺球蛋白 大鼠
