您当前的位置:
首页 > 文献资料
所属专业:
L-WRN 细胞文献资料
-
小肠类器官培养技术的建立和优化
背景:小肠类器官是体外研究肠道上皮好的工具,应用前景广泛,然而目前国内尚无相关研究报道。目的:在国内建立并优化小肠类器官培养技术,为小肠上皮细胞的基础研究提供平台。方法:常规培养 L-WRN 细胞,收集含不同浓度胎牛血清(FBS)的条件培养基。处死6~8周龄 C57BL/6小鼠,自末端回肠起取约15 cm 肠段,纵向剖开,EDTA 法分离、收集隐窝上皮,以基质胶包埋多聚化后加入不同浓度梯度的 L-WRN 条件培养基,显微镜下动态观察出芽情况,待出芽达一定长度后,重新包埋传代培养。结果:与含20% FBS 的 L-WRN 条件培养基相比,含10% FBS 的条件培养基更有利于小肠类器官的体外培养。条件培养基浓度为10%、15%、20%、25%、30%均可促使小肠类器官形成,15%条件培养基的出芽率高。结论:本研究在国内首次成功建立了小肠类器官培养技术,并发现15% L-WRN 条件培养基(含10% FBS)更有利于小肠类器官出芽。