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旋毛虫新生幼虫可溶性抗原的分析
目的 初步分析云南大理旋毛虫不同时龄新生幼虫可溶性抗原的蛋白组分及其免疫反应性.方法 以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白印迹(Western blot)对旋毛虫不同时龄新生幼虫可溶性抗原进行蛋白组分及其免疫反应性分析.结果 SDS-PAGE结果显示:24 h 旋毛虫新生幼虫可溶性抗原显示36条蛋白染色条带,相对分子质量(Mr)范围在160000～10000之间,其中主带8条,Mr分别为73000、64000、58000、54000、46000、40000、34000、25000；48h旋毛虫新生幼虫可溶性抗原显示40条蛋白染色带,Mr范围在172000～10000之间,其中主带17条,Mr分别为120000、102000、89000、87000、79000、74000、72000、64000、58000、54000、46000、40000、34000、32000、25000、18000、10000.Western blot结果:以旋毛虫感染大鼠血清检测,24h旋毛虫新生幼虫可溶性抗原出现7条反应条带,Mr分别为89000、78000、64000、58000、40000、34000、25000;48 h新生幼虫可溶性抗原出现14条反应条带,Mr分别为89000、87000、79000、74000、72000、64000、58000、40000、38000、34000、32000、25000、18000、10000.而正常大鼠血清在相应位置均无特异性反应条带出现.结论 云南大理旋毛虫24、48h新生幼虫可溶性抗原存在7个共同蛋白组分,其中48 h新生幼虫虫体可溶性抗原中存在24h新生幼虫可溶性抗原没有的5个蛋白组分,新生幼虫虫体可溶性抗原的蛋白组分随时龄的增大而增多.旋毛虫感染大鼠血清均可识别24、48h新生幼虫可溶性抗原中6个蛋白组分,说明这些蛋白组分具有较强的免疫反应性.
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旋毛虫肌幼虫3种抗原的蛋白组分及免疫反应性比较研究
目的:研究大理猪源旋毛虫肌幼虫(Trichinela spiralis musclelarvae)3种抗原:虫体可溶性抗原(body soluble antigen,BSA)、表面抗原(surface antigen,SA)和排泄分泌抗原(excretory-secretory antigen,ESA)的蛋白组分及其之间的差异,并进一步比较分析其免疫反应性,为分离和筛选出免疫原性和免疫反应性强的旋毛虫肌幼虫抗原成分打基础.方法:采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),对肌幼虫3种抗原蛋白成分进行分析;采用蛋白印迹(Western-blot)对成虫3种抗原蛋白组分进行免疫反应性分析.结果:SDS-PAGE电泳结果:BSA显示30条蛋白染色条带,分子量范围在100 kDa～12 kDa之间,其中主带11条;SA显示10条主要蛋白染色条带,分子量范围在105 kDa～28 kDa之间;ESA显示20条蛋白染色条带,分子量范围在112 kDa～10 kDa之间,其中主带11条.Western-blot结果:BSA出现25条反应条带,其中分子量为75 kDa、66 kDa、63 kDa、55 kDa、49 kDa、45 kDa、37 kDa、28 kDa、20 kDa、16 kDa的条带着色较深;sA出现7条反应条带;ESA显示14条反应带,其中53 kDa、49 kDa、45 kDa、43 kDa、35 kDa、27 kDa、18 kDa、12 kDa显色明显.结论:旋毛虫肌幼虫BSA与ESA较sA蛋白组分复杂,三者主带部分属低分子量区;免疫反应性的强度SA和ESA高于BSA,说明前两种抗原是旋毛虫肌幼虫刺激机体产生免疫应答的主要靶抗原.
