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流式细胞术检测冠心病患者外周血白细胞唾液酸黏附素的表达及临床意义
目的 观察唾液酸黏附素(Siglec-1)在冠心病(CHD)患者外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞上的表达水平,并探讨其在冠状动脉粥样硬化发病过程中的作用.方法 流式细胞术检测57例CHD患者及38名正常对照者外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞Siglec-1的百分率;生化常规测定所有入选者血脂水平.结果 流式细胞仪检测发现,Siglec-1在正常对照组及CHD组淋巴细胞和中性粒细胞上均无表达;CHD组单核细胞Siglec-1阳性率为(12.7±2.4)%,显著高于正常对照组[(1.0±0.3)%,P＜0.01],而CHD血脂正常组和血脂异常组的Siglec-1阳性率差异无统计学意义.结论作为单核巨噬细胞激活的标志,Siglec-1在外周血淋巴细胞和中性粒细胞上不表达,在正常人单核细胞上表达很低.CHD患者单核细胞Siglec-1表达明显升高,提示CHD患者外周血单核细胞已经激活,发生巨噬细胞化,Siglec-1在单核细胞黏附血管内皮及CHD的发病过程中可能起重要作用.
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幽门螺杆菌唾液酸结合黏附素(SabA)的克隆表达
目的 构建幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,简称H.pylori或Hp)唾液酸结合黏附素(sialic acid-binding adhesion,SabA)的重组质粒,并在大肠杆菌BL21中表达,为探讨SabA的功能及相关疫苗的发展提供帮助.方法 以Hp 26695株基因组为模板,设计sabA基因特异性引物扩增目的 基因,将PCR产物插入到pGEX-4T-1载体构建重组质粒,在大肠杆菌BL21中诱导表达.表达蛋白经飞行质谱鉴定,并用免疫印迹法评价其抗原性.结果 经SDS-PAGE和飞行质谱鉴定,该表达蛋白为Hp外膜蛋白SabA,经免疫印法迹检测具有良好的抗原性.结论 成功克隆了Hp的SabA,并能在大肠杆菌BL21中表达,该蛋白具有良好的抗原性.
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幽门螺杆菌黏唾液酸黏附素疫苗治疗小鼠幽门螺杆菌感染
目的:利用人类幽门螺杆菌(H. pylori)感染的小鼠模型研究唾液酸黏附素疫苗治疗H. pylori感染的作用.方法:把已感染H. pylori的小鼠分成4组,分别通过灌胃方法给予唾液酸黏附素100 μg加霍乱毒素CT 2 μg、单纯唾液酸黏附素100 μg、单纯CT 2 μg或PBS,1次/wk,共4次,治疗结束后4 wk处死动物,取胃粘膜行半定量细菌培养检查H. pylori情况.结果:治疗后各组H. pylori根除率分别为:唾液酸黏附素加CT组30%(3/10)、单纯唾液酸黏附素组、单纯CT组及PBS组根除率均为0%.差异有统计学意义.未根除H. pylori的小鼠,唾液酸黏附素加CT组H. pylori的定植密度明显低于其它3组(P＜0.05).结论:唾液酸黏附素能够作为H. pylori多价治疗疫苗的组分之一.
