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识别猪SLA的特异性人T细胞系TCR BV基因取用格局和CDR3结构多样性分析
不同T细胞克隆TCR分子的序列不同,所识别的抗原特异性也不同.其中第三互补决定区(CDR3)变异大,是TCR主要的抗原结合部位.本文采用荧光标记半定量PCR技术,用DNA测序仪作程序分析,了解猪细胞抗原致敏前后的人T细胞群和5个T细胞系24个TCR BV基因家族取用格局,并以TCE α链C区的基因片断作为内参对取用情况作定量估计.发现首次抗原致敏后培养2周的T细胞除了BV24、BV8和BV10未能检测出,其它BV基因都有不同程度的取用.然而,5个细胞系的TCR BV基因呈现十分有限的取用格局,其中两个CD4+T细胞系都取用BV12和BV14;3个CD8+T细胞系中都优势取用BV1,有两个还取用BV19.CD4+T细胞系和CD8+T细胞系之间TCR BV无交叉取用,提示两类细胞识别的抗原表位存在差异.进一步用变性凝胶扫描分析上述T细胞系取用TCR BV中的CDR3的多样性,发现未经抗原致敏的T细胞BV的CDR3结构为多峰型且呈正态分布,表明涉及多种结构不同的细胞克隆;而抗原特异性T细胞系CDR3除了一个CD8+T细胞系BV1有两个主峰外其它无例外地都显示单峰或者仅一个主峰,这从另一个角度证明建系T细胞的单克隆性.
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口腔扁平苔藓T细胞受体BV基因的优势取用初探
目的:研究口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)患者损害组织中浸润的T细胞受体(T cell receptor,TCR)BV基因的取用格局.方法:采用实时定量聚合酶链反应,分析OLP患者损害组织中浸润的T细胞和外周血中T细胞TCR BV基因的取用格局.采用GraphPad Prism version 5.00软件对数据进行Mann-Whitney U检验.结果:43例OLP患者的损害组织对BV4、BV14和BV18基因的取用显著高于39例OLP患者外周血对这些BV基因的取用.结论:OLP患者损害组织浸润的T细胞优势取用BV4、BV14和BV18基因,提示带有BV4、BV14和BV18基因的T细胞参与了OLP的发病.
