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厚朴汁炙远志对小鼠胃Cajal间质细胞Ca2+通道的影响
目的 考察厚朴汁炙远志含药血清对小鼠胃Cajal间质细胞内离子活性来影响胃动力的细胞钙通道机制.方法 采用体外小鼠胃Cajal间质细胞和含药血清共孵.实验分成:空白组、厚朴组、远志组、远志配厚朴组、厚朴汁炙远志含药血清高、中和低剂量组.采用分光光度法检测细胞内外钙离子浓度和微量ATP酶、ELISA法检测1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)浓度.结果 远志组的胞内游离Ca2浓度、ATP酶活性、和IP3浓度与空白组比较均显著升高(P＜0.05,P＜0.01),而厚朴组、远志配厚朴组,厚朴汁炙远志含药血清高和中剂量组的Ca2浓度、ATP酶活性、IP3浓度与远志组比较,显著降低(P ＜0.05,P＜0.01).结论 远志能抑制胃Cajal间质细胞活性,使细胞钙离子内流,产生自由基导致细胞成分破坏,诱发细胞凋亡;而厚朴汁炙远志能缓解细胞钙超载,维持细胞稳态,从而缓解胃动力障碍.
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厚朴汁炙远志含药血清对胃Cajal间质细胞活力及nNOS表达的影响
目的:考察厚朴汁炙远志炮制品含药血清对胃Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)活力及胞内nNOS表达的影响,从细胞水平阐释其降低胃动力障碍的生物学机制.方法:采用体外培养胃Cajal间质细胞,再加入含药血清与之共培养的方法开展实验.实验分为空白组、厚朴10 g/kg组、远志20 g/kg组、厚朴汁炙远志炮制品高剂量30g/kg组4个不同组,采用MTT比色法检测细胞活性、We stern-Blot法分析各药对细胞内nNOS表达的影响.结果:远志20g/kg组ICC细胞的OD值明显低于空白组,且细胞突起变短,网状脱落;而厚朴10g/kg组、厚朴汁炙远志30g/kg组细胞OD值明显高于空白组和单味远志组.免疫印迹法检测结果显示,远志20g/kg组的nNOS的表达与空白组比较明显增强,厚朴10g/kg组的表达明显下降,远志20 g/kg组呈下降趋势.结论:远志能抑制胃动力起搏细胞活性,抑制胃间质细胞nNOS表达增强;而厚朴汁炙远志能明显促进细胞活性、下调nNOS表达从而缓解胃动力障碍.
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厚朴汁炙远志炮制品对胃间质细胞活力影响的探讨
目的:探索研究不同剂量厚朴汁炙远志炮制品对胃间质细胞活力的影响.方法:将实验分成空白组、远志组、厚朴组、厚朴汁炙远志高、中、低剂量组、远志配厚朴1:2组七个不同剂量组对培养的胃间质细胞进行干预,24 h后采用四唑盐比色实验(MTT法),考察厚朴炮制远志的水煎液及其含药血清对胃间质细胞活力的影响.结果:厚朴汁炙远志炮制品水煎液对胃间质细胞活力的影响结果显示,与单味生远志20 g.kg1组比较,空白组、单味厚朴10 g·kg-1组、炮制高剂量30 g·kg-1组、远志配厚朴1:2 (30 g·kg-1)组的胃间质细胞OD值均显著增高(F=2.750,P=0.024);厚朴汁炙远志炮制品含药血清对胃间质细胞活力的影响结果显示,炮制高剂量30 g·kg-1组、远志配厚朴1:2 (30 g·kg-1)组的含药血清的胃间质细胞OD值均显著高于空白组(F=10.22,P=0.000);且单味厚朴10 g·kg-1组、炮制高剂量30 g·kg-1组、远志配厚朴1:2组(30 g·kg-1)的OD值均显著高于单味远志组(F=10.22,P＜0.05).结论:远志有抑制胃动力起搏细胞活性趋势,单味厚朴组、厚朴汁炙远志炮制品组、远志配厚朴1:2组均能极显著促进胃间质细胞活力,从而促进胃动力,故推测厚朴能通过促进胃间质细胞的活力,在配伍和炮制过程中降低远志对胃间质细胞造成的伤害,而达到缓解胃肠动力障碍的目的.
