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囊泡膜核苷酸转运体在核苷酸囊泡转运机制的研究进展
核苷酸在细胞内的运输不能自由穿过细胞膜,其储存与运输必须以囊泡运输的方式进行跨膜转运,当囊泡与胞膜融合时将核苷酸等内容物质释放到细胞外[1].要探讨细胞外核苷酸/核苷激发的信号通路,就必须要理解三磷酸腺苷(ATP)和其他核酸是如何从细胞内释放出来的,而这也是生理学上的一个重要问题[2];自从囊泡膜核苷酸转运体(vesicular nucleotide transporter,VNUT)被发现,其就作为ATP转运的关键因子而被广泛关注[3];现将VNUT在核苷酸囊泡转运机制的研究新进展进行综述.
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胰高血糖素样肽1对INS-1细胞VNUT基因表达影响
目的 探讨胰高血糖素样肽1 (GLP-1)对大鼠胰腺β细胞(INS-1)内囊泡膜核苷酸转运体(VNUT)基因表达的影响及其机制.方法 采用半定量RT-PCR、Western blot方法,检测INS-1细胞加入1、5和10 nmol/L的GLP-1培养60 min以及10 nmol/L的GLP-1培养3、6和12 h时VNUT mRNA和蛋白表达.结果 加入1、5和10 nmol/L的GLP-1培养60 min后,INS-1细胞VNUT mRNA和蛋白表达随GLP-1浓度升高而升高,差异有显著意义(F=18.59、26.73,P＜0.05).加入10 nmol/L的GLP-1培养3、6和12h时,INS-1细胞VNUT mRNA和蛋白表达随培养时间的增加均明显上升,差异有统计学意义(F=20.71、15.45,P＜0.05).结论 GLP-1能促进INS-1细胞VNUT mRNA和蛋白表达.
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葡萄糖对INS-1细胞VNUT基因表达的影响及机制探讨
目的 通过观察不同浓度葡萄糖对大鼠胰腺β瘤细胞(INS-1)内囊泡膜核苷酸转运体(VNUT)基因表达和胰岛素分泌的影响,旨在初步探讨葡萄糖对VNUT与胰岛素分泌的影响,为进一步探讨胰岛素分泌机制奠定基础.方法 采用半定量RT-PCR、Western blot和ELISA等方法检测不同浓度葡萄糖对INS-1细胞VNUT基因表达水平以及C-肽分泌情况从而反映胰岛素分泌水平.结果 葡萄糖可升高INS-1细胞VNUT基因表达并刺激胰岛素的分泌,在2.8mmol/L和15 mmol/L葡萄糖环境下培养的INS-1细胞中VNUT基因mRNA水平分别为(0.218±0.069)和(0.524±0.158),差异有统计学意义(P＜0.05);Western blot的结果也反映VNUT基因蛋白在高糖浓度下表达水平上升(P＜0.05);而C-肽的测定结果为(84.52±11.03)pg/mL和(118.79± 13.48) pg/mL,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 葡糖糖能刺激INS-1细胞分泌胰岛素,其机制可能是通过使VNUT基因表达增加从而产生胰岛素分泌信号而实现的.
