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干细胞终板软骨干细胞纯度文献资料
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两种不同单克隆法筛选大鼠腰椎终板软骨干细胞能力的比较
目的 比较两种不同的单克隆方法获取大鼠腰椎终板软骨干细胞筛选能力.方法 获取大鼠腰椎终板软骨组织后,Ⅱ型胶原酶消化法获取原代细胞(P0),将P0代细胞按照100个/cm2、200个/cm2、300个/cm2的密度接种于10 cm培养皿上,为P0组;将原代细胞先接种于T25培养瓶,待其贴壁融合30％～40％时再消化,按照100个/cm2、200个/cm2、300个/cm2的密度接种于10 cm培养皿,为P1组.倒置相差显微镜下观察两组细胞集落形成速度及生长形态;0.1％结晶紫染色,计算两组的集落形成百分比;使用干细胞表面标记物CD44和CD90,流式细胞仪检测两组获取干细胞的纯度.结果 将两组的细胞按上述密度进行培养后,P1组细胞集落形成时间早于P0组,且集落数目也较P0组多,但镜下观察其细胞形态及集落形态不如P0组;P1组的集落形成数目远大于P0组,两组按照100个/cm2的密度接种时,其细胞集落形成百分比大;流式细胞仪检测,对于CD44,P0组表达率(92.17±1.26)％,P1组为(74.37±2.63)％;对于CD90,P0组表达率(95.30±3.42％),P1组为(90.87±1.42％).结论 两种不同的单克隆方法都可以筛选出大鼠腰椎终板软骨干细胞,但是使用原代细胞直接接种时,得到的干细胞纯度更高.
关键词： 单克隆筛选法 干细胞终板软骨干细胞纯度
