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脑切片文献资料
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LTP的研究进展(Ⅰ)
LTP(长时程动作电位增强,或称长时程增强)是目前神经科学热点课题.各方面研究支持LTP与学习及记忆过程相关.基于其发生机制,LTP可分为NMDA受体依赖性和Mossy fiber LTP两类.前一类由突触后NMDA受体激活,导致钙离子内流,钙浓度升高而引发,后一类则是蛋白激酶A活动引起突触前膜内钙离子浓度升高.结果神经递质释放增强,终引起LTP.本文概述了脑片技术对LTP研究的贡献,LTP发生与维持的相关因素,以及新LTP研究的有趣发现.下期继续LTP话题,我们将介绍近与LTP相关的BDNF(脑组织神经生长因子)及基因遗传学研究.
关键词： 长时程动作电位增强 钙离子 脑切片 N-甲基-D-天冬氨酸受体 -
地高辛标记的原位杂交法检测神经肽Y表达的条件优化
目的:优化用地高辛标记的原位杂交法检测小鼠海马结构中神经肽Y的表达.方法:用体外转录法获得地高辛标记的神经肽Y的反义和正义RNA探针.用kainic acid诱导小鼠脑组织中神经肽Y表达,2 h后牺牲小鼠,制备12μm厚的海马组织切片.然后比较不同pH值(7.5～9.5)的固定剂,不同的固定时间,不同的杂交前预处理,以及不同预杂交及杂交液对杂交信号的影响.结果:从pH 7.5～9.5,不同碱性固定液对杂交信号没有明显影响.30 min的固定时间足以获得满意的杂交结果.用蛋白酶K部分消化切片或用TritonX-100打孔反而降低了杂交信号.40 mg/L Salmon sperm DNA或250 mg/L bakers yeast RNA可获得与Denhardt's杂交液相同的杂交信号.结论:通过优化,我们获得了一种简便而又有效的地高辛标记的原位杂交法,用于检测神经肽Y表达.
