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hTPO和hNIS共转染胶质瘤细胞碘摄取和131I治疗的实验研究
目的 构建含有人甲状腺过氧化物酶基因(hTPO)的重组腺病毒,并与人钠-碘转运体基因(hNIS)共转染至神经胶质瘤细胞中,研究其摄碘能力及对肿瘤细胞的杀伤能力,探讨131I治疗胶质瘤的可能性.方法 应用AdEasy系统构建重组腺病毒AdTPO,利用重组质粒将hNIS基因转染入神经胶质瘤细胞系U251中获得hNIS-U251细胞系作为阴性对照组,再利用重组腺病毒AdTPO将TPO基因转染入hNIS-U251细胞系中获得AdTPO-hNIS-U251作为实验组,未转入hTPO和hNIS的细胞U251作为空白对照组.研究三组细胞的摄碘实验、过氯酸盐抑制实验、有机化测定实验检测其摄碘功能,细胞克隆形成实验评价131I对转染肿瘤的杀伤作用.结果 成功构建出重组腺病毒AdTPO,并在稳定表达hNIS的U251细胞中实现了hTPO的共转染.hNIS-U251组(每分钟放射性计数55769.96±4353.26)比空白对照组(每分钟放射性计数507.67±57.69)摄碘能力增高约110倍,有效半衰期7分钟,有机化程度约为0.1%,细胞克隆形成率(9.08±2.86)%,较对照组减低约10倍.AdTPO-hNIS-U251组(每分钟放射性计数74647.53±3605.88)比空白对照组摄碘能力增高约147倍,有效半衰期延长至13分钟,有机化程度增高至10%,细胞克隆形成率(6.80±2.09)%,较对照组减低约13倍.结论 将hTPO和hNIS共转染至神经胶质瘤细胞后,可有效提高细胞的摄碘能力,hTPO延长了放射性碘在细胞中的停留时间,131I对瘤细胞有较强的杀伤作用.