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亚砷酸钠对人正常肝细胞L-02细胞周期蛋白D1和细胞周期依赖激酶4的影响
目的 研究亚砷酸钠(NaAsO2)对人正常肝细胞L-02细胞周期蛋白D1 (Cyclin D1)和细胞周期依赖激酶4(CDK4)表达的影响.方法 以0(对照)、50、100、150 μmol/L NaAsO2处理L-02细胞24 h,采用流式细胞仪检测细胞周期变化,采用实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹检测Cyclin D1、CDK4 mRNA和蛋白表达水平.结果 细胞周期检测:与对照组G0-G1期[(60.33±0.40)％]比较,除50 μmol/L NaAsO2组细胞比例[(54.58±0.40)％]减少外,100、150 μmol/L NaAsO2组细胞比例[(64.60±0.62)％、(83.13±0.25)％]显著增加,差异均有统计学意义(P均＜ 0.05);对照组,50、100、150 μmol/L NaAsO2组S期细胞比例逐渐减少[(34.35±0.30)％、(29.89±0.32)％、(29.50±0.44)％、(11.93±0.12)％],差异均有统计学意义(P均＜0.05);对照组,50、100、150 μmol/L NaAsO2组G2-M期细胞比例[(5.32±0.11)％、(15.54±0.14)％、(5.90±0.20)％、(4.93±0.15)％]比较,差异有统计学意义(F=908.359,P＜0.05).Cyclin D1和CDK4检测:对照组,50、100、150 μmol/NaAsO2组Cyclin D1 mRNA(0.48±0.17、1.00±0.31、1.00±0.21、2.06±0.53)和蛋白(0.65±0.02、0.64±0.05、0.71±0.10、0.84±0.05)表达水平比较,差异均有统计学意义(F=167.886、46.575,P均＜0.05);对照组,50、100、150 μmol/L NaAsO2组CDK4 mRNA(1.04±0.19、1.00±0.21、1.29±0.22、231±0.31)和蛋白(0.67±0.04、0.74±0.03、0.83±0.07、0.94±0.04)表达水平比较,差异均有统计学意义(F=95.171、145.848,P均＜0.05).结论 NaAsO2通过改变细胞周期调控因子Cyclin D1、CDK4 mRNA和蛋白表达水平,使L-02肝细胞的生长周期阻滞于G0-G1期,终导致细胞损害的发生.
