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  • Cu2+-Aβ复合物与Aβ单体诱导神经元H2O2释放作用的比较研究

    作者:倪雯雯;谭小芳;于丰祥;宫平;陈功;侯丽娜;李娟

    目的:比较不同摩尔比Cu2+-Aβ复合物与Aβ单体诱导神经元H2O2释放作用的差异.方法:制备不同摩尔比(0.1-5)的Cu2+-Aβ复合物,通过检测硫磺素T(ThioflavinT,ThT)荧光强度考察Cu2+对Aβ纤丝形成的影响.利用原代培养的大鼠海马神经元细胞,分别以不同摩尔比Cu2+-Aβ复合物,不同浓度Cu2+-Aβ复合物(摩尔比为1),以及Aβ单体和C矿处理细胞,检测培养上清中的H2O2含量;分离线粒体,分别检测不同浓度Cu2+-Aβ复合物(摩尔比为1),以及Aβ单体和Cu2+处理后H2O2的释放;观察不同摩尔比Cu2+-Aβ复合物,不同浓度Cu2+-Aβ复合物(摩尔比为1),以及Aβ单体和Cu2+对神经元细胞活力的影响.结果:(1)ThT荧光试验结果表明,Cu2+与Aβ(10μM)摩尔比为1~5范围内可明显抑制Aβ纤丝形成.(2)Cu2+-Aβ复合物(摩尔比为1~5;Aβ浓度为10 μM)以及摩尔比为1的Cu2+-Aβ复合物(Aβ浓度分别为5,10μM)可显著诱导神经元释放H2O2;另外,摩尔比为1时,Cu2+-Aβ复合物还可诱导神经元线粒体内H2O2释放;上述作用均强于Aβ单体或Cu2+.(3)Cu2+-Aβ复合物(摩尔比为1~5)可显著降低神经元细胞活力,该作用强于Aβ单体或Cu2+.结论:与Aβ单体相比,Cu2+-Aβ复合物诱发神经元细胞及其线粒体释放H202作用更强,并诱发更为明显的神经元毒性.提示Cu2+与Aβ之间的配位结合可能增强其引发活性氧释放以及神经元毒性反应;Cu2+-Aβ复合物引发的活性氧可能主要来自线粒体.

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