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两种不同密度分离液分离的脐血CD34+、CD34-细胞造血活性比较
目的:比较两种不同密度的ficoll-泛影葡胺分离造血干细胞群的效果,找出更适合分离脐血造血干、祖细胞的分离密度,为脐血造血干细胞的医学研究及临床应用提供一定依据.方法:采集脐血6份,根据密度梯度离心法,用质量分数为(1.068±0.001)g/mL、(1.077±0.001) g/mL ficoll-泛影葡胺分离液等量分离同一份脐血,分别计数这两种分离液的单个核细胞获得率及细胞存活率,得到的单个核细胞再分别经免疫磁珠分选法获得高纯度的CD34+细胞及除去了CD34+的单个核细胞(CD34-depletedMNCs),统计分析这两种不同密度分离液获得的CD34+细胞、CD34-depletedMNCs在甲基纤维素中形成CFU-GM集落数.结果:①(1.068:±0.001) g/mL、(1.077±0.001) g/mL两种分离液分离的单个核细胞平均密度分别为(1.52± 1.0)× 106个/mL、(2.84+ 0.98)× 106个/mL,(P＞0.05);经免疫磁珠纯化后的CD34+细胞占单个核细胞(MNCs)的比率分别是(1.26±0.47)％、(1.07±0.15)％,(P＞0.05);②(1.068±0.001)g/mL分离的单个核细胞经免疫磁珠纯化后1.5×103个CD34+细胞形成CFU-GM的集落(140.5±14.5)显著多于(1.077±0.001) g/mL的集落数(118.3±13.8)(P＜ 0.05);(1.068± 0.001) g/mL分离的5x 104个CD34-depletedMNCs形成的CFU-GM集落数(132.0± 5.1)也显著多于(1.077±0.001) g/mL的集落数(101.3±9.4),(P＜0.05).结论:与1.077 g/mL Ficoll相比,1.068g/mL Ficoll-泛影葡胺分离液分离的单个核细胞中的CD34+、CD34-细胞造血活性更强,更适合用来分离脐血中造血干细胞群.
关键词： 脐血 造血干、祖细胞 单个核细胞 Ficoll-泛影葡胺分离液 密度梯度离心 -
粘附分子和造血干细胞移植
造血干细胞移植(HSCT)是供者的造血干、祖细胞(HSPC)归巢到受者的造血微环境中(HIM),并在其中增殖、分化进而重建造血和免疫功能.而HSPC和HIM上的粘附分子(AM)对整个移植起到了至关重要的作用.本文着重从探讨HSPC上AM功能的角度介绍AM对HSCT的重要性.
