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整体胚胎原位杂交文献资料
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斑马鱼NUP98基因的克隆及其时空表达图谱
目的:斑马鱼NUP98基因的克隆及其在个体早期发育过程中的表达情况研究.方法:提取斑马鱼胚胎的总RNA,制备地高辛标记的NUP98 RNA反义探针,WISH(整体胚胎原位杂交)研究NUP98在斑马鱼早期发育过程中的表达;提取斑马鱼胚胎各时相和成鱼各组织的RNA,实时定量PCR检测斑马鱼胚胎各时相和成鱼各组织中的表达.结果:成功克隆斑马鱼NUP98基因,通过实时定量RT-PCR和原位杂交,获得NUP98基因在斑马鱼早期发育过程中的表达情况:NUP98在2-cell、32-cell、oblong、shield期、12h前普遍性表达(0.75 h、1.7 h、3.7 h、6h、12 h);24 h以后在眼部、头部表达较多,特别是在脊索表达较高;斑马鱼NUP98在0、0.5 h、6h、12h、24 h、48 h表达逐渐降低,到72 h和96 h表达有所增加,但是仍低于24h其表达水平;NUP98在成鱼眼、脑、鳔、肾、肝、睾丸、胆囊、卵巢、鳍、心、肠、肌肉、腮、皮肤的表达中,眼的表达高,明显高于其他组织,腮、卵巢、肠的表达次之,肌肉、鳔、胆囊、睾丸、皮肤、脑的表达紧随其后,鳍、肝、心、肾的表达低.结论:NUP98基因可能在个体脑部、脊索及眼部的早期发育过程中起到了重要作用;NUP98基因可能具有抑制肿瘤发生的作用,该基因的调节异常对白血病的发生发展可能有重要影响.这些研究结果为进一步研究NUP98基因在造血系统中的作用,评估其是否适合作为血液系统恶性肿瘤的新的治疗靶点等奠定了理论基础.
