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Carnoy's预固定剂量对中期染色体分散度的影响
目的 定量研究Carnoy's预固定剂量变化对外周血淋巴细胞中期染色体分散度的影响.方法 用0.075 moL/L KCl对经培养的外周血淋巴细胞于37℃低渗处理35 min;在预固定环节,Carnoy's液的量分别控制在1.25%、2.50%、3.75%、6.25%和12.25%(终体积浓度);常规制备中期染色体标本,Giemsa染色后观察不同预固定剂量下淋巴细胞及中期染色体的分散质量,计算中期染色体铺展的面积及染色体的分散质量.结果 当预固定剂量占总体积的1.25%、2.50%或3.75%时,染色体的分散质量较好,可用核型多,当预固定剂比例≥6.25%后,细胞间相互黏连的程度和染色体间相互积聚的倾向愈发明显.对染色体铺展面积的定量结果显示,预固定剂比例为1.25%、2.50%和3.75%时,分裂相核型的平均分布面积分别为1 246±236 mm2、1 143±178 mm2和l 017±163 mm2,均显著高于预固定剂用量为6.25%和12.25%时中期分裂相核型的平均分布面积:876±81 mm2和518±65 mm2,双侧t检验显示组间比较差异显著(P＜0.05).结论 在染色体标本制备过程中,预固定剂的用量是终影响染色体分散质量的重要因素之一.
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三种不同固定液对小鼠组织过碘酸雪夫染色效果比较
目的 比较小鼠肝脏、肾脏、小肠三种组织在质量分数4％多聚甲醛液、Carnoy's液、Bouin,s液三种固定液不同固定时间下的制片质量和过碘酸雪夫染色(PAS)效果,筛选出一种为适用的固定方法.方法 取成年雄性C57BL/6小鼠肝脏、肾脏、小肠,分别固定于三种固定液,固定时间分别是质量分数4％多聚甲醛液:24h、48 h、72 h;Camoy's液:4h、8h、12 h;Bouin's液:12 h、24 h、48 h,充分固定后,常规制作石蜡切片,然后进行PAS染色,对比观察染色效果.结果 三种固定液对不同组织、不同固定时间下PAS染色结果存在差异.肝脏、肾脏、小肠经Camoy's液处理12h后PAS效果佳,质量分数4％多聚甲醛液固定24 h基本满足观察检测效果,而经Bouin's液固定组织染色效果相对较差.结论 PAS反应对固定液和固定时间具有选择性,Camoy's液是组织进行PAS染色的理想固定液,但从固定效果、重复性、安全性、成本等多因素综合考虑,在PAS反应中,质量分数4％多聚甲醛液可以替代Camoy's液.
