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荧光定量RT-PCR法快速检测麻疹病毒核酸
麻疹是由麻疹病毒引起的一种以发热、呼吸道症状和出疹为特征的急性传染病.目前确诊麻疹的实验室手段主要是用酶联免疫吸附试验(EUSA)法检测麻疹特异性IgM抗体,但在感染初期以及免疫功能低下的患者中该抗体的滴度较低,EUSA法检测可能为阴性[J].
关键词： 麻疹病毒核酸 荧光定量RT-PCR 检测 -
荧光定量-聚合酶链反应法快速检测麻疹病毒核酸
目的:采用荧光定量-聚合酶链反应(FQ-PCR)法,检测麻疹病毒核酸,用以建立和推广一种敏感、特异、快速的麻疹检测新技术.方法:TaqMan特异性荧光标记探针法,进行特异性、敏感性和麻疹疑似患者临床标本的检测.结果:FQ-PCR法检测麻疹病毒核酸具有高度的特异性和敏感性,本次试验检测灵敏度达0.1 TCID50.在14份麻疹患者咽拭子标本中,有13份标本检出麻疹病毒核酸,从核酸提取至完成检测仅需3 h.结论:FQ-PCR法为麻疹病毒核酸检测提供了一种可靠的方法.
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承德市2006年麻疹疑似病例实验室检测分析
目的:对2006年麻疹疑似病例实验室检测结果进行分析.方法:采用细胞培养法进行麻疹病毒分离和鉴定;采用荧光定量-聚合酶链反应法检测麻疹病毒核酸;抗体捕捉ELISA法测定麻疹IgM抗体和风疹IgM抗体.结果:79份咽拭子标本中,分离到16株麻疹病毒,阳性率为20.25%,16株麻疹病毒均为Hla基因亚型;253份血清标本中,145份标本麻疹IgM抗体阳性,阳性率为57.31%,在34份麻疹IgM抗体阴性血清标本中,13份风疹IgM抗体阳性,阳性率为38.24%;14份麻疹疑似患者咽拭子标本中,13份标本检出麻疹病毒核酸,阳性率为92.86%.结论:实验室检测在麻疹监测系统中有非常重要的作用,承德市流行的麻疹病毒为Hla亚型;采用的荧光定量-聚合酶链反应法是一种快速、特异、敏感的检测方法,此方法的建立,将使麻疹网络实验室技术不断扩展和完备.
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实时荧光RT-PCR法快速检测麻疹病毒核酸
目的 采用实时荧光RT-PCR法快速检测麻疹病毒核酸,早期确诊麻疹疑似病例,为及时采取防控措施,减少麻疹的暴发流行提供科学的实验依据.方法 对沈阳市2013年4月-11月63份麻疹疑似病例,在出疹3d内采集静脉血和咽拭子.血清标本采用ELISA法检测麻疹IgM抗体,咽拭子标本采用实时荧光RT-PCR法检测麻疹病毒核酸,核酸检测阳性的标本进行病毒分离.结果 63份麻疹疑似病例中麻疹病毒IgM抗体有27份为阳性,阳性率为42.86％;麻疹病毒核酸有32份为阳性,阳性率为50.79％;核酸检测阳性标本中,4份分离到麻疹病毒,分离率为12.50％.麻疹IgM抗体检测和实时荧光RT-PCR检测同为阳性27份,同为阴性31份;实时荧光RT-PCR检测阳性而麻疹IgM抗体检测阴性的为5份,2种方法检测的总符合率为92.06％.结论 实时荧光RT-PCR法是一种灵敏、准确、安全的快速检测麻疹病毒核酸的方法,可用于麻疹病毒感染的早期诊断.
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2014年银川市麻疹监测病例的检测与分析
目的 对2014年银川市麻疹监测病例进行实验室检测与分析.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、荧光定量-聚合酶链反应法(FQ-PCR)、细胞培养法分别检测麻疹IgM抗体、麻疹病毒核酸和分离鉴定麻疹病毒,据此对麻疹监测病例进行实验室诊断.结果 麻疹IgM抗体阳性率为25.1％ (53/211),麻疹病毒核酸阳性率为30.3％(64/211),麻疹IgM抗体检测阳性而核酸检测阴性者5例,麻疹病毒核酸检测阳性而IgM抗体阴性者16例,两种检测方法阳性检出率差异有统计学意义(x2=4.76,P ＜0.05);69份实验室确诊麻疹病例的咽拭子标本中分离到11株麻疹病毒.结论 2014年银川市流行的麻疹病毒为H1a型;荧光定量-聚合酶链反应法和酶联免疫吸附试验联合检测,相互结合、相互补充,对于麻疹监测病例早期快速诊断有很好的应用价值.
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蚌埠市2015年麻疹疑似病例实验室检测结果分析
目的 分析2015年蚌埠市麻疹疑似病例实验室检测结果,了解麻疹流行状况.方法 采集2015年共784份疑似麻疹病例血清标本,采用酶联免疫捕获法检测血清标本中麻疹IgM抗体,采用荧光定量PCR法检测咽拭子标本中麻疹病毒核酸.结果 检测血清标本784份,麻疹IgM抗体阳性261份,阳性检出率为33.29％;检测咽拭子标本128份,麻疹病毒核酸阳性67份,阳性检出率为52.34％.结论 血清学检测和核酸检测互为补充,结合运用能够提高麻疹病原学诊断的检出率.
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麻疹病毒核酸实时荧光定量PCR方法的建立
目的:采用实时荧光定量PCR法检测麻疹病毒核酸,尽旱确诊麻疹疑似病例,减少麻疹的暴发流行.方法:选取开封市2015年4月-8月的68例麻疹疑似病例,ELISA法检测血清中IgM抗体,实时荧光定量PCR法检测咽拭予标本中麻疹病毒核酸.结果:68例麻疹疑似病例中麻疹病毒IgM抗体阳性有29份,占42.65％;核酸检测阳性有35份,占51.47％.麻疹IgM抗体检测和实时荧光定量PCR检测同为阳性29份,同为阴性33份;实时荧光定量PCR.检测阳性而麻疹IgM抗体检测阴性的为6份,总符合率为91.18％.结论:实时荧光定量PCR法是一种安全、准确、灵敏的检测麻疹病毒核酸的方法,可用于早期诊断麻疹病毒感染.
