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重组Ⅱ型溶瘤单纯疱疹病毒文献资料
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重组Ⅱ型溶瘤单纯疱疹病毒纯化工艺的建立
目的 建立重组Ⅱ型溶瘤单纯疱疹病毒(oncolytic herpes simple virus typeⅡ,oHSV2)OH2纯化工艺,制备高纯度的病毒.方法 采用不同粗滤材质[PDH4囊式过滤器、Bio20囊式过滤器、Ultipor GF U6-40、PP材质滤膜(聚丙烯膜)和CA材质滤膜(醋酸纤维膜)]澄清过滤后,使用不同的层析柱(Mustang Q、Sartobind Q囊式离子交换柱和CaptoTM Core 700)进行纯化,并根据确定的纯化工艺,迸一步放大层析柱体积.依据病毒滴度的变化,选择合适的纯化工艺条件.结果 PP及CA材质滤膜过滤病毒液后滴度变化较小,二者对病毒吸附较低;Mustang Q、Sartobind Q囊式离子交换柱纯化OH2病毒时收率高为13％,而CaptoTM Core 700在AKTA仪上纯化高滴度的病毒液时几乎不损失病毒;使用CaptoTM Core 700进行柱体积放大后,柱床直径为26 mm时,纯化后病毒的滴度及收率较理想.结论 使用CA膜过滤细胞裂解液后,采用CaptoTM Core 700进行柱层析,可制备高纯度的OH2.
