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A群脑膜炎球菌荚膜多糖文献资料
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A群脑膜炎球菌荚膜多糖排溢法ELISA的建立及初步应用
目的 建立A群脑膜炎球菌荚膜多糖(Group A meningococcal polysaccharide,GAMP)排溢法ELISA,并进行验证及初步应用.方法 采用改良过碘酸盐氧化法制备抗GAMP-HRP.以抗GAMP单克隆抗体包被酶标板,抗GAMP-HRP作为酶标抗体,建立检测GAMP的排溢法ELISA.采用棋盘滴定法确定包被抗体及酶标抗体的佳工作浓度,并对其特异性、敏感性及重复性进行验证.采用建立的排溢法ELISA检测GAMP-TT系列层析样品中的GAMP抗原活性,并与传统一步法ELISA及二步法ELISA进行比较.结果 建立的排溢法ELISA的包被抗体佳浓度为20 μg/ml,酶标抗体佳工作浓度为1:128.该方法的特异性良好,敏感性与一步法和二步法相当,批内和批间变异系数与一步法相当;该方法检测GAMP-TT层析样品中的GAMP抗原活性的结果与二步法ELISA基本一致.结论 排溢法ELISA的操作步骤与一步法ELISA大致相似,但较二步法ELISA显著简化,其对一步法ELISA中Hooks效应的纠正效果与二步法ELISA相同.
关键词: A群脑膜炎球菌荚膜多糖 单克隆抗体 排溢法酶联免疫吸附测定