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重组人干扰素βSer17的结构及活性分析
目的分析大肠杆菌表达的重组人干扰素βSer17(rhIFN-Ser17)的分子结构及其生物学活性.方法通过Western blot、氨基酸末端测序、质谱及生物学活性分析等,对大肠杆菌表达的rhIFN-Ser17分子进行鉴定.结果大肠杆菌表达的rhIFN-βser17的N末端20个氨基酸及C端2个氨基酸序列与文献报道一致,产物的相对分子质量为19 877.9,比活性超过2×107 IU/mg蛋白.结论大肠杆菌表达的rhIFN-βSer17分子结构与理论推测值完全一致.
关键词: 重组人干扰素βSer17 末端序列分析 质谱分析 生物学活性 -
重组人干扰素βSer17的制备及其对SARS病毒的抑制作用
目的制备重组人干扰素-βSer17(rhIFN-βSer17),并检测其对SARS病毒的抑制作用.方法通过发酵收集菌体,经高压匀浆破碎收集包涵体、有机溶剂抽提、酸沉淀、柱层析纯化重组蛋白,通过细胞病变抑制法检测其对SARS病毒的抑制作用.结果研制的rhIFN-βSer17的纯度超过95%,比活性超过2.0×107 IU/mg蛋白,在体外对SARS病毒具有明显的抑制作用.结论已成功制备rhIFN-β Ser17,并在体外对SARS病毒具有抑制作用.
关键词: 重组人干扰素βSer17 SARS病毒 抑制作用 -
注射用重组人干扰素βser17的分离纯化及鉴定
重组人干扰素βser17(rhIFN-β ser17)工程菌经发酵培养后,采用高压匀浆破菌、离心分离包涵体、有机抽提、酸沉淀、Sephacryl S-200、Sephadex G-75等进行分离纯化,通过各种方法对终产品进行鉴定.结果显示,纯化的rhIFN-βser17比活性超过2×107IU/mg,纯度超过99%,其它各项质量指标均符合质量标准.通过研究建立了大规模制备rhIFN-βser17的纯化工艺,研制出了符合规程要求的注射用rhIFN-βser17纯品,为临床研究奠定了基础.
关键词: 重组人干扰素βSer17 纯化 鉴定