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马立克病文献资料
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马立克病潜伏期L-meq基因对CEF细胞p53 mRNA转录水平的影响
目的 研究鸡马立克病(MD)潜伏期L-meq基因对鸡胚成纤维细胞(Chicken embryo fibroblast,CEF)p53 mRNA转录水平的影响,并探讨L-meq基因与端粒酶活性的关系.方法 构建真核转染质粒pcDNA-L-meq,转染CEF细胞,采用实时荧光相对定量RT-PCR法检测MD潜伏期L-meq基因对CEF细胞p53 mRNA转录水平的影响,并用改进的TRAP法检测端粒酶活性.结果 质粒pcDNA-L-meq经PCR及双酶切鉴定,均可见大小为1 200 bp的特异性片段.L-meq基因能激活CEF细胞中p53 mRNA的转录,在转染后48和72 h,p53 mRNA的转录水平较相应的内参照升高,但在转染后72 h,p53 mRNA转录水平降低,其RQ值由48 h的0.15下降为72 h的0.05.转染L-meq基因48和72 h后,CEF细胞中端粒酶活性均比对照组稍微升高,但在48 h的端粒酶活性比72 h的稍高.结论 鸡马立克病潜伏期L-meq基因能微弱地刺激端粒酶活性和p53 mRNA转录.
