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  • 胸膜肺炎放线杆菌血清型特异的疫苗候选基因的筛选及痤疮丙酸杆菌异源免疫

    作者:雷连成;韩文瑜;孙长江;杨鹏;冯新

    目的 筛选猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)1型与5型特异的疫苗候选基因,并研究瘴疮丙酸杆菌对猪传染性胸膜肺炎的异源免疫.方法 采用cDNA代表性差异分析、大肠杆菌核糖体展示、免疫筛选和RT-PCR技术筛选APP 1型和5型血清型特异的疫苗候选基因,进行克隆、测序及同源序列分析.并用与APP疫苗候选基因具有同源序列的痤疮丙酸杆菌(PA)免疫小鼠,研究其对APP感染的异源免疫.结果 获得血清1型APP 6条疫苗候选基因,2条为未知基因,2条与PA同源性为98%,2条与人cDNA有同源性.获得血清5型APP 7条疫苗候选基因,其中2条为未知基因,2条与PA同源性分别为93%和100%.用PA全菌免疫小鼠,产生的抗血清可与1型和5型APP发生强的免疫反应,ELISA检测效价达1:3 200;脾淋巴细胞检测结果 显示,免疫组CD3+、CD4+T细胞的百分率及CD4+/CD8+比值与对照组相比均升高,两组CD3+T细胞百分率差异有显著意义.以10倍LD50 1型和5型APP分别感染PA免疫小鼠,小鼠存活率分别为95%和90%,并且在攻毒后第15天体内APP可全部被清除.结论 1型与5型APP存在不同的疫苗候选基因,痤疮丙酸杆菌与之存在共同抗原,能够产生交叉免疫应答,对血清1型和5型APP的感染具有预防作用.

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