首页 > 文献资料
-
TMPyP4-PDT对人卵巢癌A2780细胞的杀伤作用及其对MCM2和CA-Ⅸ mRNA表达的影响
目的:观察四-(N-甲基-4-吡啶基)卟啉(TMPyP4)对人卵巢癌A2780细胞的光动力学杀伤作用及其对微型染色体维持蛋白2(MCM2)和碳酸酐酶Ⅸ(CA-Ⅸ)mRNA表达水平的影响,阐明TMPyP4-PDT(光动力疗法)对人卵巢癌A2780细胞的杀伤作用机制.方法:体外培养人卵巢癌A2780细胞株,按不同处理因素分为空白对照组、单纯TMPyP4组、单纯PDT组和TMPyP4-PDT组.采用CCK-8法检测TMPyP4-PDT对A2780细胞株的增殖抑制作用.流式细胞术测定不同浓度TMPyP4对A2780细胞株凋亡的影响.光镜下观察各组细胞HE染色的形态学变化.实时荧光定量PCR法检测MCM2和CA-Ⅸ mRNA表达水平的变化.结果:与空白对照组比较,单纯TMPyP4组随着药物浓度的增加,细胞的增殖抑制率逐渐增加(P＜0.05)；单纯PDT组细胞增殖抑制率增加不明显(P＞0.05)；TMPyP4-PDT组细胞增殖抑制率随着药物浓度及激光能量密度的增加而增加(P＜0.05).流式细胞术检测,TMPyP4-PDT可诱导A2780细胞凋亡,在激光能量密度为4J·cm-2的条件下,3、6、15、30和60 μmol· L-1 TMPyP4作用4h,A2780细胞凋亡率分别为(9.46±0.04)％、(17.7±0.3)％、(25.4±0.2)％、(30.2±0.2)％和(66.3±0.3)％.光镜下可观察到空白对照组及单纯PDT组贴壁细胞多,无核固缩及核碎裂样改变；单纯TMPyP4组及TMPyP4-PDT组贴壁细胞减少,出现核固缩、空泡及部分胞浆溶解样改变.实时荧光定量PCR法检测,在激光能量密度为4J·cm-2的条件下,3、6、15、30和60 μmol·L-1TMPyP4作用4h,MCM2和CA-Ⅸ mRNA表达水平明显降低,与空白对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论:TMPyP4-PDT对人卵巢癌A2780细胞有明显杀伤作用,其机制可能与负性调节MCM2和CA-Ⅸ的表达有关.
