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不同产地蒺藜核糖体DNA内转录间隔区序列分析
目的 通过测定核糖体DNA内转录间隔区(Ribosomal DNA internal transcribed spacer,rDNA-ITS)基因序列,确定不同产地的蒺藜在种质遗传上是否存在差异.方法 利用PCR产物直接测序,测定不同产地蒺藜的rDNA-ITS基因序列.结果 测得ITS碱基序列742 bp,其中ITS1全部序列267 bp,5.8 S全部序列167 bp,ITS2全部序列209 bp.6个产地的蒺藜样品的ITS的碱基序列完全相同.结论 不同地区的蒺藜在种质上没有发生变异.
关键词： 蒺藜 核糖体DNA内转录间隔区 种质鉴定 产地 -
蕺菜rDNA ITS序列分析的正交试验条件的初步研究
以蕺菜DNA为模板,采用正交试验设计,对影响蕺菜rDNA ITS区扩增的重要参数进行了优化试验,以期建立蕺菜rDNA ITS扩增反应的优化体系.结果表明,优蕺菜ITS-PCR的反应体系为25 μl反应体系中含Taq酶0.75 U、Mg~(2+)(1 mmol/L)1.0 μl、dNTP(0.15 mmol/L)1.5 μl、引物对(0.6 Fmol/L)1.2 μl、模板DNA(10 ng/μl)2.0 μl、10×buffer(不含Mg~(2+)2.5μl.这一体系的建立为利用蕺菜rDNA ITS区研究蕺菜种质资源的系统进化提供了标准化程序.
关键词： 蕺菜 聚合酶链式反应 核糖体DNA内转录间隔区 正交试验 -
不同产地蒺藜种质鉴定和化学成分聚类分析
目的 测定不同产地的蒺藜的种质遗传,和药效物质基础上的一致性.方法 利用PCR产物直接测序,测定不同产地蒺藜的核糖体DNA内转录间隔区(rDNA-ITS)的基因序列；对蒺藜的化学成分进行HPLC分析,以相关系数法对色谱结果进行模糊聚类.结果 测得ITS碱基序列742 bp,其中,ITS1全部序列267 bp,5.8 S全部序列167bp,ITS2全部序列209bp,六个产地的蒺藜样品的ITS的碱基序列完全相同；在0.90的置信水平上,六个产地的蒺藜样品聚为一类.结论 不同地区的蒺藜在种质上是一致的,在药效物质基础上没有太大的差异.
关键词： 蒺藜 核糖体DNA内转录间隔区 种质鉴定 模糊聚类
