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糖尿病大鼠早期视网膜病变中Akt通路的变化观察
目的 探讨Akt通路对糖尿病大鼠早期视网膜病变的影响.方法 将40只SD大鼠,体重180～220 g,随机分组,其中20只作为糖尿病组,另20只作为正常对照组.糖尿病组采用1％链脲佐菌素(strep tozotocin,STZ),按50 mg/kg体重一次性经鼠尾静脉注射建立1型糖尿病模型.去除2只死亡及未成模大鼠,糖尿病鼠成模后每周监测血糖、体重,第4周、8周两组大鼠分批麻醉后取材利用ADP酶组织化学法进行视网膜铺片观察视网膜血管的形态分布及改变,以及石蜡切片免疫组织化学法监测Akt蛋白染色颗粒阳性率的表达,并检测p-Akt (Ser473)和p-Akt (Thr308)磷酸化水平.结果 (1)实验期间(4、8周),糖尿病组大鼠体重明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),而血糖则显著高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).(2) ADP酶组织化学显示:正常对照组视网膜血管自视盘发出的大血管向四周呈放射状分布,毛细血管分布均匀;糖尿病组4周与正常对照组视网膜相比均无明显变化,未见周边部毛细血管迂曲以及形成扭结或血管袢现象.但在8周时,糖尿病组可见视网膜周边部毛细血管迂曲明显.(3)免疫组织化学分析结果显示,相比正常对照组,糖尿病组大鼠视网膜上总Akt、p-Akt (Ser473)及p-Akt (Thr308)染色颗粒的阳性率明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05).且糖尿病8周组比4周组依次有所降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 糖尿病SD大鼠视网膜中总Akt、p-Akt (Ser473)及p-Akt (Thr308)的表达水平较正常对照组明显减少,可能是糖尿病大鼠视网膜病变的重要机制之一.
