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成骨细胞接种于脱蛋白骨中修复骨缺损的实验研究
目的探讨成骨细胞悬液接种于脱蛋白型松质骨中对骨缺损修复的能力.方法以28天胎兔颅骨为骨源,用酶消化法分离成骨细胞,取第3代成骨细胞制成细胞悬液,以5×106/ml浓度接种于具有三维空间结构的异种脱蛋白型松质骨中,然后用此复合物修复兔颅骨缺损,本组作为实验组(共10只).对照组Ⅰ(共10只),仅用异种脱蛋白型松质骨修复兔颅骨缺损.对照组Ⅱ(共10只)为成骨细胞.对照组Ⅲ(共10只)为空白对照组.结果 8周后,实验组:X线片均显示骨缺损周围有骨小梁通过,支架上有钙化阴影.大体观察:缺损周围与正常骨组织之间无分界线,植入物硬度接近于正常骨组织.组织学分析:支架上有大量新骨形成,支架有部分被降解吸收. 四环素荧光标记证实在支架上有新生骨.所有对照组均无新生骨,仅见缺损区有纤维样组织覆盖.结论体外培养的成骨细胞经增殖后接种于异种脱蛋白型松质骨中可以用来修复骨缺损.
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以异种脱蛋白型松质骨为支架构建组织工程骨修复骨缺损实验研究
目的:探讨以异种脱蛋白型松质骨为支架接种成骨细胞悬液构建的组织工程骨对骨缺损修复的能力.方法:以28天胎兔颅骨为骨源,用酶消化法分离成骨细胞,在体外培养、增殖后,取第三代成骨细胞制成细胞悬液,以5×106mL-1浓度接种于异种脱蛋白型松质骨中,体外培养一周,然后用此复合物修复兔颅骨缺损1.5cm×1.5cm,本组作为实验组(共10只).对照组Ⅰ(共10只),仅用异种脱蛋白型松质骨修复兔颅骨缺损.对照组Ⅱ(共10只),缺损区注射相同浓度的成骨细胞悬液.对照组Ⅲ(共10只)为空白对照.术后4、8周从X片上观察对X-Ray阻射情况.8周取材,进行大体标本、扫描电镜及组织学评价.结果:实验组:4、8周X摄片均显示骨缺损周围有骨小梁通过,支架上有钙化阴影并随时间延长密度增高.术后8周,大体标本观察:缺损周围与正常骨组织之间无分界线,植入物硬度接近于正常骨组织,扫描电镜观察:支架上有胶原纤维及成骨细胞附着,组织学分析:支架上有大量新骨形成,支架有部分被降解吸收,四环素荧光标记证实在支架上有新生骨.所有对照组均无新生骨,仅见缺损区有纤维样组织覆盖.结论:以异种脱蛋白型松质骨为支架构建的组织工程骨可以用来修复骨缺损.
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脱基质型松质骨对成骨细胞内游离钙及碱性磷酸酶水平的影响
目的研究猪脱蛋白型松质骨(DPB)、脱钙型松质骨(DB)对成骨细胞内游离钙(Ca2+)浓度、碱性磷酸酶(ALP)活性的影响,探讨这两种材料的生物相容性.方法体外分离培养SD乳大鼠颅骨成骨细胞,纯化后与猪脱蛋白型松质骨、脱钙型松质骨复合,培养7天后测定Ca2+浓度、ALP活性.结果脱钙型松质骨组成骨细胞Ca2+浓度、ALP活性高于脱蛋白型松质骨组及空白组.脱蛋白型松质骨组成骨细胞Ca2+浓度、ALP活性与空白组无明显差异.结论两种材料对细胞内游离钙浓度及碱性磷酸酶活性无不良影响,脱钙型松质骨对于成骨细胞的合成、分泌有促进作用.游离钙浓度及碱性磷酸酶活性能够反映组织工程支架材料的生物相容性,可作为评价组织工程材料生物相容性的指标.
