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大鼠骨髓间充质干细胞培养的首次换液模式
背景:细胞的培养时间、数量及纯度是影响干细胞移植的关键因素,优化体外细胞培养模式可以提高移植的成效.目的:观察不同的首次换液模式、相同的后期换液条件对大鼠骨髓间充质干细胞培养时间及生物学特性的影响.方法:全骨髓贴壁法培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,按首次换液方式分为以下6组:24 h半量换液组、24 h全量换液组、48 h半量换液组、48 h全量换液组、72 h半量换液组、72 h全量换液组,以后每4 h全量换液.记录各组第0~3代培养时间及细胞纯度.结果与结论:各组培养总时间比较差异有显著性意义(F=46.455,P<0.05),48 h全量换液组短,24 h全量换液组长,与其他组比较差异均有显著性意义(P<0.05).24 h全量换液组各代细胞纯度均高,72 h半量换液组各代细胞纯度均低,与其他组比较差异均有显著性意义(P<0.05).所获细胞CD29、CD90阳性,CD34、CD45阴性,可以向成骨、成脂诱导分化.结果显示首次换液方式能影响大鼠骨髓间充质干细胞的培养周期及其纯度,48 h半量换液为佳首次换液方式.
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不同首次换液模式对大鼠骨髓间充质干细胞培养的影响
目的 探讨不同首次换液模式对大鼠骨髓间充质干细胞培养的影响.方法 全骨髓贴壁法培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,按首次换液方式分为以下6组:A.24 h 半量换液;B.24 h 全量换液;C.48 h 半量换液;D.48 h 全量换液;E.72 h 半量换液;F.72 h 全量换液,以后每48 h 全量换液.记录各组P0~P3培养时间及细胞纯度,流式细胞仪及成骨、成脂诱导鉴定,MTT法检测细胞增殖能力.结果 各组培养总时间比较差异具有统计学意义(F=46.455,P<0.05),D组短(16.61±1.61)d,B组长(21.50±1.70)d,B、D组与各组间差异均具有统计学意义(P<0.05).B组各代纯度均高,P3纯度达(90.84±2.19)%.E组各代细胞纯度均为低,P3纯度为(76.04±3.21)%.P3代纯度比较,B、E组与其他各组差异有统计学意义(P<0.05).所获细胞CD29、CD90阳性、CD34、CD45阴性,向成骨、成脂诱导分化,MTT检测显示细胞增殖能力良好.结论 首次换液方式能影响大鼠骨髓间充质干细胞的培养周期及其纯度,48 h 半量换液为佳首次换液方式.
