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静电贴附海藻酸钙微球制备自组装支架
背景:微球型注射支架在软骨组织工程中具有良好的发展前景,但是常存在体内成型困难和微球游走等问题.目的:探讨利用静电作用力将负电性海藻酸钙微球与正电性壳聚糖微球贴附在一起制备自组装支架的可行性.方法:用乳化内部凝胶法制备表面带负电荷的海藻酸钙微球,用喷雾干燥法制备表面带正电荷的壳聚糖微球.扫描电镜观察微球的表面形貌、光学显微镜分析微球的粒径及其粒径分布,zeta电位仪测定微球的表面电位;将两种带电荷微球的悬浮液混合在一起制备自组装支架,用光学显微镜和扫描电镜观察微球间的静电贴附情况,并对支架的压缩弹性模量进行了分析.结果与结论:海藻酸钙微球的平均粒径为52.5 um,表面电位为-23.5 mV,壳聚糖微球的平均粒径为4.1 μm,表面电位为+9.8 mv,两种微球表面光滑,成球性良好;光学显微镜和扫描电镜下可以观察到小粒径的壳聚糖微球能够将海藻酸钙微球贴附在一起,支架的压缩弹性模量随微球固含量的增加而增加,随溶液离子强度的增加而减小,随壳聚糖微球与海藻酸钙微球质量比的增加,先增加后减小,当壳聚糖微球与海藻酸钙微球质量比为2:1时支架的压缩弹性模量佳.提示正电性的壳聚糖微球可将负电性的海藻酸钙微球贴附在一起而形成自组装型支架.
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成骨细胞接种于珊瑚体外培养的扫描电镜观察
目的研究家兔成骨细胞在西沙群岛滨珊瑚上的贴附与生长 . 方法 10块立方形 ( 5 mm× 5 mm× 5 mm) 的西沙群岛滨珊瑚处理后 , 将骨髓基质干细胞来源的成骨细胞与其复合 , 体外培养 2、 4、 7、 14、 28 d后 , 扫描电镜下观察成骨细胞在珊瑚表面贴附数量和形态 , 分裂增殖能力及功能 . 结果从 2 d开始 , 珊瑚表面及孔内即有细胞粘附生长 , 随时间延长 , 细胞数量急剧增加 , 到 14～ 28d时 , 全部长满 , 并分泌大量胶原纤维和形成钙化结节 . 结论西沙群岛滨珊瑚作为组织工程骨的载体 , 在体外与成骨细胞具有良好的相容性 .
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兔骨髓间充质干细胞在Cytodex 3微载体悬浮培养系统中的贴附条件优化
骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)在组织工程及基因治疗中具有重要的应用价值,为实现MSCs体外动态扩增,本研究采用微载体培养技术,考察兔MSCs接种入Cytodex 3微载体悬浮培养系统后的贴附情况.在低速连续搅拌条件下,MSCs接种后8～12 h贴附达到平衡,贴附率仅为16.7%±1.1%;采用间歇搅拌方式、50%培养体积接种、降低贴附期培养基中血清浓度均使MSCs贴附率有显著提高;在四种培养基体系中,MSCs在αMEM中的贴附率比DMEM中平均高39.8%.与常规条件相对照,采用优化后的接种方法,贴附率从26.6%提高到65.5%,细胞总体扩增倍数从2.01提高到4.50.本研究结果为实现MSCs在微载体悬浮培养系统中大量扩增奠定了基础.
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纤维连接蛋白对磷酸钙陶瓷表面修饰促进大鼠成骨细胞的贴附
目的：研究大鼠成骨细胞在经纤维连接蛋白表面修饰后的有孔磷酸钙陶瓷上的贴附及生长。方法：4块立方形（5mm×5mm×5mm）的有孔磷酸钙陶瓷，随机分成实验组和对照组。实验组陶瓷在负压条件下用重组人纤维连接蛋白(100μg/ml)浸渍过夜。再将两组陶瓷与大鼠成骨细胞共同培养10d，扫描电镜下观察比较实验组与对照组成骨细胞在陶瓷表面的贴附数量和形态。结果：实验组成骨细胞的贴附数量显著高于对照组（P<0.01），并分泌大量胶原纤维和形成钙化结节。结论：纤维连接蛋白对磷酸钙陶瓷的表面修饰能明显提高大鼠成骨细胞的贴附率，有利于成骨细胞的生长及成骨表型。
