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电镜免疫金标记在大肠癌细胞GST-Pi定位中的应用
目的探讨免疫电镜胶体金技术在大肠癌细胞GST-Pi定位中的应用及某些关键技术环节的处理.方法应用免疫电镜胶体金技术对6例大肠癌及3例正常大肠粘膜细胞进行GST-Pi的定位观察.结果大肠粘膜细胞结构清晰,金颗粒呈团状、点灶状分布,特异性强,无非特异性散在金颗粒.结论免疫电镜金标记技术是大肠癌细胞GST-Pi超微结构定位的有效方法.对某些关键性技术环节的处理是获得理想免疫金染色切片的保证.
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人肺腺癌顺铂耐药细胞A549/CDDP对铂类化疗药的敏感性及耐药基因表达改变的研究
目的:探讨人肺腺癌细胞系A549/CDDP对铂类化疗药耐药的机制.方法:应用MTT法检测人肺腺癌细胞A549及其顺铂耐药细胞A549/CDDP对铂类化疗药(CDDP、CBD及L-OHP)的敏感性,应用RT-PCR法比较两细胞系多药耐药基因(包括MDR1,ABCG2,MRP1,LRP),DNA-polβ和GST-pi等在mRNA水平的表达差异,筛选出差异基因,用Western blotting法验证该基因在蛋白水平的表达差异.结果:MTT实验发现,与人肺腺癌细胞系A549相比,顺铂耐药细胞A549/CDDP对CDDP的耐药系数(RI)为7.877,而A549/CDDP细胞也对CBD及L-OHP交叉耐药(RI分别为4.486及2.352);RT-PCR发现两细胞系的MDR1,ABCG2,MRP1,LRP及GST-pi等耐药基因在mRNA水平无明显差异,但A549/CDDP细胞中DNA-polβ在mRNA及蛋白表达水平均较A549细胞明显升高.结论:A549/CDDP细胞内DNA-polβ表达升高可能与铂类耐药有关.
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不同食管上皮组织中GST-Pi的表达及意义
目的 探讨食管不同上皮组织中GST-Pi表达以了解其在癌发生发展过程中的作用.方法 应用免疫组化SP法观察40例"正常"食管鳞状上皮、10例轻度不典型增生、20例重度不典型增生和40例食管鳞状上皮癌组织中GST-Pi蛋白阳性表达率.结果 由正常"食管鳞状上皮-轻度不典型增生-重度不典型增生-食管癌组织中GST-Pi的表达呈逐渐降低的趋势看出,癌组织的表达明显低于正常上皮和轻度增生组,差异均有显著意义(P＜0.01).结论 GST-Pi可能与食管癌的发生、发展密切相关.
