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人TAK1基因启动子活性的研究
目的 鉴定人TAK1启动子片段结构,探索调控TAK1基因高水平转录的启动片段.方法 利用生物信息学软件分析TAK1基因启动子结构,构建TAK1启动子序列系列截短的萤光素酶报告基因重组体,脂质体法转染滑膜成纤维样细胞(Fibroblast-like synoviocytes,FLS),应用双荧光素酶活性检测系统检测启动子的活性.结果 人TAK1基因-260 ~ +25 bp片段具有高转录活性,明显高于其他片段,而-88 ~ +25 bp启动子片段活性低.结论 人TAK1基因-260 ~-170 bp是主要的转录调控区,是进一步研究DNA结合蛋白的调控靶序列.
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TAK1基因在类风湿性关节炎滑膜组织的表达与活化研究
目的 研究转化生长因子β激活激酶(TAK1,MEKK7)基因在类风湿性关节炎滑膜组织的表达与活性变化,探讨其与类风湿性关节炎的关系.方法 本实验采用病例对照研究分别利用RT-PCR和Westem-blot方法检测类风湿性关节炎(RA)、骨性关节炎(OA)及非关节炎病人膝关节滑膜中TAK1基因mRNA和蛋白质的表达,并利用磷酸化抗体比较其活性差异,以验证TAK1与类风湿性关节炎发病的相关性.结果 TAK1 mRNA和蛋白在RA病人膝关节滑膜的表达水平明显高于OA和行膝关节镜探查术未见异常的病人,其TAK1酶活性亦高于OA和行膝关节镜探查术未见异常的病人.结论 TAK1基因与类风湿性关节炎发病发生、发展有一定的相关性.