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人大肠癌与肠隐窝结构相关性的研究
目的:从人大肠实体瘤不同远近距离部位取癌旁组织进行体外培养.探讨人大肠组织体外培养条件,以及不同条件下,培养不同时间与肠隐窝结构的相关性.方法:分别从大肠癌恶性肿瘤患者距瘤体旁边(约2cm),手术切除的近端远处(≥10cm),以及两者的中间位取得手术标本,运用重复贴壁法进行贴壁培养.结果:运用倒置显微镜观测,用无血清进行培养的组织块存活成活率为73.3％,含10％的胎牛血清培养液进行培养的组织块存活率81.7％,含20％的胎牛血清培养液进行培养的组织块存活率86.7％.HE染色观察,无血清培养的标本14天内,可看到隐窝完整结构,含10％和20％的胎牛血清培养的标本7天内,可看到隐窝完整结构.结论:人大肠组织块的存活时间与血清浓度成正相关,而隐窝完整结构的保持时间与血清浓度呈负相关.
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人大肠癌癌旁组织体外培养研究
目的:建立大肠癌癌旁组织体外3-D培养实验平台,观察距瘤体不同距离肠上皮组织体外生长特性.方法:大肠癌手术时,分别从肿瘤近端距瘤体2cm、5cm、10cm的部位取肠上皮组织,运用重复贴壁法进行3-D培养,观察组织生长形态特征、肠隐窝微架构变化特征.结果:组织完全贴壁,上皮粘膜位于”气-液”交界进行培养有利于组织块的存活与成长;培养液中牛血清浓度对组织块生长及肠隐窝结构的维持有很大的影响,牛血清的存在不利于组织的存活,其浓度越高组织生长越受到抑制;血清的存在也很不利于隐窝微架构的存在,血清浓度越高肠隐窝微架构丧失的越快.结论:无血清培养条件下,结肠癌旁近、中、远三个不同部位的组织都可以进行体外培养,但培养过程中,维持隐窝初离体时的结构还是比较困难,培养3d隐窝结构变化不大,7-21d隐窝结构内细胞会逐渐降解.血清的存在不利于隐窝的结构维持,隐窝结构丧失得更快.
